Phospho-HSF1-S326 Lapin pAb pour WB, ELISA - Q00613

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du HSF1 (Heat Shock Factor 1)

• Le HSF1 fonctionne comme un facteur de transcription inductible par le stress qui stimule l'expression des protéines de choc thermique (HSP) pour protéger les cellules des dommages. Dans les cellules non stressées, il est maintenu sous forme de monomère inactif dans un complexe HSP90 ; lors d'un stress, il se trimérise, se lie aux éléments de choc thermique (HSE) et active la transcription des gènes HSP. Références connexes : PMID:11447121, PMID:12659875, PMID:12917326, PMID:11583998, PMID:16278218, PMID:9727490, PMID:10359787
• Lors d'un stress de choc thermique, le HSF1 forme un complexe associé à la chromatine avec TTC5/STRAP et p300/EP300 pour stimuler la transcription HSR, augmentant ainsi la survie cellulaire. Références connexes : PMID:18451878
• Le HSF1 active la transcription de FOXR1, qui à son tour régule à la hausse les chaperons de choc thermique HSPA1A et HSPA6 ainsi que la réductase antioxydante DHRS2. Références connexes : PMID:34723967
• Au-delà de l'activation transcriptionnelle, le HSF1 réprime la transcription de c-fos induite par Ras, favorise le traitement en 3' de l'ARN pré-messager de HSP70 et médie l'export nucléaire de l'ARNm de HSP70. Références connexes : PMID:9341107, PMID:14707147, PMID:17897941
• Le HSF1 joue un rôle dans la progression mitotique et agit comme un régulateur négatif de la réparation de l'ADN par jonction d'extrémités non homologues (NHEJ). Références connexes : PMID:18794143, PMID:26359349
• Le HSF1 est impliqué dans la réactivation latente du VIH-1 en se liant au promoteur LTR viral et en recrutant des facteurs d'élongation transcriptionnelle.
• Le HSF1 se localise dans le noyau, le cytoplasme, et s'associe aux pôles du fuseau, aux centrosomes et aux kinétochores. Il est régulé par phosphorylation sur plusieurs sites, y compris la sérine 326, qui est critique pour son activation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps a été élevé contre un phosphopeptide synthétique englobant la sérine 326 du HSF1 humain et reconnaît spécifiquement la forme phosphorylée. Incluez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse pour protéger l'épitope.
• Pour le WB, le poids moléculaire attendu est d'environ 57 kDa. Utilisez des lysats cellulaires humains soumis à un choc thermique vs non traités comme témoins positifs/négatifs. Envisagez de traiter les échantillons avec la phosphatase lambda pour confirmer la spécificité phospho.
• Dans l'ELISA, optimisez la concentration de l'antigène de revêtement et la dilution de l'anticorps. Associez à un système de détection approprié pour une analyse quantitative.
• Validez la réactivité croisée dans votre système expérimental (échantillons humains attendus).

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