Phospho-Histone H3-T3 Lapin pAb pour WB, ELISA - Q16695 / P68431

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H3

• L'Histone H3.1t (également désignée H3/g ou H3.4) est un variant testiculo-spécifique de l'histone H3 canonique. Elle est codée par le gène H3-4 (HIST3H3) et appartient à la grande famille des histones H3, qui comprend des gènes supplémentaires tels que HIST1H3A.
• En tant qu'histone centrale, H3 s'assemble avec H2A, H2B et H4 pour former l'octamère d'histones qui constitue le nucléosome, l'unité répétitive fondamentale de la chromatine. Les nucléosomes compactent l'ADN en une structure qui restreint l'accès à l'information génétique.
• Cette compaction joue un rôle central dans la régulation de la transcription, de la réplication de l'ADN, de la réparation de l'ADN et de la stabilité chromosomique globale. Le déroulement ou le remodelage contrôlé des nucléosomes permet à la machinerie cellulaire de lire, copier ou réparer la matrice d'ADN.
• La fonction des histones est régulée dynamiquement par un ensemble complexe de modifications post-traductionnelles sur leurs queues N-terminales – le « code histone ». Celles-ci incluent la phosphorylation (par ex. sur la Thr-3), l'acétylation, la méthylation et bien d'autres, qui agissent ensemble pour moduler l'état de la chromatine et recruter des protéines effectrices en aval.
• H3.1t se localise exclusivement dans le noyau et est intégrée à la chromatine. Conformément à son rôle dans l'empaquetage de l'ADN, elle est étroitement associée aux chromosomes tout au long du cycle cellulaire.
• L'expression de H3.1t est largement restreinte aux cellules testiculaires, suggérant une fonction spécialisée dans la réorganisation de la chromatine pendant la spermatogenèse. D'autres variants de H3 sont exprimés plus largement et remplissent des rôles nucléosomiques similaires dans les cellules somatiques.
• Les mots-clés UniProt pour H3.1t incluent « Phosphoprotéine », « Acétylation », « Méthylation », « Citrullination » et « ADP-ribosylation », soulignant le paysage de modifications extensif qui régit ses fonctions.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique couvrant la Thr-3 de l'HIST1H3A humaine. Cette conception vise à générer des anticorps qui reconnaissent spécifiquement la forme phosphorylée de l'histone H3. Les chercheurs doivent confirmer la spécificité en comparant les signaux entre des échantillons traités à la phosphatase et non traités.
• L'anticorps est validé pour le Western blot (WB) et l'ELISA. Pour le WB, des lysats cellulaires totaux ou des extraits enrichis en histones peuvent être utilisés, et une bande proche de 15 kDa est attendue. La migration peut varier selon l'état de modification de H3. Incluez toujours des inhibiteurs de phosphatases pendant la lyse et la préparation des échantillons pour préserver le signal de phosphorylation.
• En ELISA, envisagez de revêtir la plaque avec le peptide phosphorylé ou la protéine histone phosphorylée. Incluez des contrôles appropriés (par ex., un peptide non phosphorylé) pour évaluer la spécificité de liaison.
• La réactivité croisée prédite est large (humain, souris, rat et autres) en raison de la forte conservation de la queue N-terminale de H3 chez les vertébrés. Cependant, une validation dans l'espèce et le tissu concernés est recommandée avant les applications quantitatives.
• Pour les applications en immunohistochimie ou immunocytochimie, notez que l'anticorps n'a pas été initialement développé pour ces formats ; des tests pilotes avec des conditions appropriées de récupération antigénique et de détection sont conseillés.

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