Ac mAb de lapin anti-Histone H2AX phospho-S139 pour WB, IP, IF/ICC, ELISA - P16104

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Histone H2AX

• L'Histone H2AX (H2A.X) est une variante de l'histone H2A qui remplace l'H2A conventionnelle dans un sous-ensemble de nucléosomes.
• Elle joue un rôle central dans la régulation de la transcription, la réparation de l'ADN, la réplication de l'ADN et la stabilité chromosomique en compactant l'ADN en chromatine et en régulant l'accessibilité de l'ADN par des modifications post-traductionnelles.
• La phosphorylation sur la Ser139 (γ-H2AX) est critique pour la reconnaissance des cassures double-brin de l'ADN (DSB) et le recrutement de la machinerie de réparation de l'ADN, en faisant un marqueur clé des dommages à l'ADN.
• Nécessaire pour l'arrêt du cycle cellulaire médié par les points de contrôle en réponse à de faibles doses de rayonnements ionisants et pour une réparation efficace des DSB.
• Localisée dans le noyau et associée aux chromosomes.
• Soumise à de multiples modifications post-traductionnelles, notamment l'acétylation, la phosphorylation et l'ubiquitination, qui affinent sa fonction dans la réponse aux dommages de l'ADN.
• Le gène H2AX (H2AFX) est un membre de la famille des gènes de l'histone H2A et est largement conservé.
• Son poids moléculaire prédit est d'environ 15 kDa, ce qui est cohérent avec sa migration typique sur SDS-PAGE.

Guidance expérimentale et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique phosphorylé autour de la S139 de l'Histone H2AX humaine ; pour une détection spécifique de la phosphorylation, envisagez d'inclure des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons.
• Pour valider la spécificité de l'anticorps pour la forme phosphorylée, comparez les signaux de lysats non traités par rapport à ceux traités à la phosphatase.
• Pour le Western blot, une bande autour de 15 kDa est attendue ; assurez-vous d'utiliser des marqueurs de poids moléculaire appropriés.
• En immunofluorescence, les foyers γ-H2AX sont un marqueur classique des cassures double-brin de l'ADN ; envisagez d'induire des dommages à l'ADN avec des agents comme l'étoposide ou des rayonnements ionisants pour amplifier le signal.
• Pour l'ELISA, utilisez un peptide phosphorylé comme antigène de revêtement et un homologue non phosphorylé comme témoin négatif.

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