mAb de lapin anti-Phospho-HER2/ErbB2-Y1139 pour WB et ELISA - P04626

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de HER2/ErbB2

• HER2 (Recepteur tyrosine-protéine kinase erbB-2) est une protéine tyrosine kinase qui fait partie des complexes de récepteurs à la surface cellulaire, nécessitant un corécepteur pour la liaison au ligand. Il est essentiel à la signalisation neureguline-récepteur, bien que les neuregulines ne se lient pas directement à lui.
• Il régule la croissance et la stabilisation des microtubules périphériques via la voie MEMO1-RHOA-DIAPH1, conduisant à l'inhibition de GSK3B, à l'association membranaire d'APC et CLASP2, et à la capture des microtubules par MACF1.
• Dans le noyau, HER2 agit comme facteur de transcription, se liant au promoteur PTGS2/COX-2 au niveau de la séquence 5'-TCAAATTC-3' et activant sa transcription ; il est également impliqué dans l'activation de CDKN1A impliquant STAT3 et SRC.
• Il améliore également la transcription de l'ARNr par l'ARN polymérase I, favorisant la synthèse protéique et la croissance cellulaire.
• Au niveau sous-cellulaire, HER2 se localise sur la membrane cellulaire, les crêtes membraneuses, les endosomes précoces, le cytoplasme (périnucléaire) et le noyau, ce qui est cohérent avec ses doubles rôles de signalisation et de transcription.
• Spécificité tissulaire : Exprimé dans divers tissus tumoraux, notamment les tumeurs mammaires primaires et les tumeurs de l'intestin grêle, de l'œsophage, du rein et de la bouche.
• Caractéristiques clés : C'est une glycoprotéine membranaire de type I à passage unique, avec activité kinase, contenant un site de liaison à l'ATP, des sites de phosphorylation et des ponts disulfures. Il est impliqué dans des réarrangements chromosomiques, l'épissage alternatif et des variants pathologiques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'anticorps a été obtenu contre un peptide phosphorylé synthétique entourant la tyrosine 1139 du HER2 humain. Pour le Western blot, il est recommandé d'utiliser des conditions de blocage spécifiques à la phosphorylation et des inhibiteurs de phosphatases appropriés lors de la préparation des échantillons pour préserver l'épitope phosphorylé.
• Compte tenu du poids moléculaire prévu de 138 kDa, assurez-vous d'avoir des conditions de séparation sur gel et de transfert adéquates pour les protéines de haut poids moléculaire en Western blotting.
• Pour l'ELISA, il est conseillé de valider l'anticorps avec des peptides phosphorylés et non phosphorylés pour confirmer la spécificité. Incluez des témoins positifs et négatifs appropriés, tels que des lysats de lignées cellulaires sur-exprimant HER2 et traitées à la phosphatase.
• La réactivité croisée est rapportée pour l'humain ; vérifiez la réactivité avec d'autres espèces si nécessaire. Puisque HER2 est un récepteur transmembranaire, envisagez d'utiliser des fractions enrichies en membranes pour améliorer la détection.

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