Phospho-GSK3β-S9 Lapin pAb - P49841

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la GSK3β

• La GSK3β (glycogène synthase kinase-3 bêta) est une sérine/thréonine protéine kinase constitutivement active qui régule négativement la synthèse du glycogène, la signalisation Wnt et les facteurs de transcription en phosphorylant des cibles telles que la glycogène synthase, la bêta-caténine et JUN. Références connexes : PMID:11430833, PMID:12554650, PMID:14690523, PMID:1846781
• Dans la voie Wnt, la GSK3β forme un complexe de destruction avec APC et AXIN1, phosphorylant la bêta-caténine pour la cibler vers une dégradation protéasomale médiée par l'ubiquitine. Références connexes : PMID:12554650
• La phosphorylation de la protéine associée aux microtubules TAU au résidu Thr-548 par la GSK3β réduit la capacité de TAU à stabiliser les microtubules, un processus lié à la formation des enchevêtrements neurofibrillaires dans la maladie d'Alzheimer. Références connexes : PMID:14690523
• La GSK3β se localise dans le cytoplasme, le noyau et la membrane cellulaire, lui permettant de participer à plusieurs cascades de signalisation.
• Elle est exprimée dans les testicules, le thymus, la prostate et l'ovaire, avec une expression plus faible dans le poumon, le cerveau et le rein ; dans les cerveaux atteints de la maladie d'Alzheimer, elle colocalise avec EIF2AK2/PKR et TAU.
• La kinase régule également le rythme circadien en phosphorylant les composants de l'horloge BMAL1 et CLOCK, et module l'autophagie via l'acétylation de KAT5/TIP60 en conditions de starvation. Références connexes : PMID:19946213, PMID:28903391, PMID:30704899

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps a été élevé contre un peptide phosphorylé synthétique correspondant à la GSK3β humaine autour du résidu Ser9 ; confirmez la spécificité phospho-spécifique en traitant les échantillons avec la phosphatase lambda ou en utilisant un test de compétition par peptide non phosphorylé.
• Le poids moléculaire prédit de la GSK3β est d'environ 47 kDa ; optimisez le pourcentage de gel SDS-PAGE et les conditions de transfert pour le Western blot afin d'obtenir une séparation claire des bandes.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), envisagez une récupération d'antigène induite par la chaleur dans un tampon citrate (pH 6,0) et titrez l'anticorps primaire pour maximiser le rapport signal/bruit.
• En immunofluorescence (IF/ICC), validez les protocoles de fixation et de perméabilisation pour votre système cellulaire, car la GSK3β peut se localiser dans plusieurs compartiments sous-cellulaires.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat a été rapportée ; vérifiez la réactivité dans le tissu ou le lysat cellulaire de votre espèce cible avant des expériences à grande échelle.

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