Anticorps polyclonal de lapin Phospho-GRIN2B-Y1474 pour WB, ELISA - Q13224

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de GRIN2B

• GRIN2B code pour la sous-unité GluN2B (NR2B) des récepteurs N-méthyl-D-aspartate (NMDA), qui sont des canaux cationiques hétérotétramériques activés par ligand, à haute perméabilité calcique et dont le blocage dépend du voltage par le Mg2+. Références associées : PMID:24272827, PMID:24863970, PMID:26875626
• L'activation du canal requiert la liaison simultanée du glutamate sur GluN2, de la glycine ou de la D-serine sur GluN1, et une dépolarisation membranaire pour lever le blocage par le Mg2+, ce qui permet l'influx de Ca2+/Na+ et l'efflux de K+. Références associées : PMID:24272827, PMID:24863970, PMID:26875626
• La sous-unité GluN2B confère des propriétés de canal distinctes, notamment en matière de cinétique d'activation/désactivation, de sensibilité au pH, de perméabilité au Ca2+ et d'interactions avec les modulateurs allostériques. Références associées : PMID:26875626, PMID:28095420, PMID:28126851
• Il est majoritairement exprimé dans le cortex fronto-pariéto-temporal et les cellules pyramidales de l'hippocampe, avec des niveaux plus faibles dans les ganglions de la base, ce qui confirme son rôle dans l'apprentissage, la mémoire et la cognition.
• La localisation subcellulaire inclut la membrane cellulaire postsynaptique, les projections dendritiques, les endosomes tardifs, les lysosomes et le cytosquelette, ce qui reflète un trafic dynamique et une dégradation régulée.
• La phosphorylation sur Ser-1303 par DAPK1 au niveau des sites extrasynaptiques augmente l'activité du récepteur NMDA, contribuant à la surcharge excitotoxique en Ca2+ et à la mort neuronale irréversible dans des modèles d'AVC.
• Les mutations de GRIN2B sont associées à l'encéphalopathie épileptique du développement (DEE27, EIEE27) et à la déficience intellectuelle (MRD6), ce qui souligne ses rôles neurologiques essentiels.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps phospho-spécifique cible le Y1474 de GRIN2B humain ; confirmez sa spécificité en utilisant un peptide non phosphorylé ou des lysats traités à la phosphatase comme contrôles négatifs.
• Pour le WB, le poids moléculaire prédit est de 166 kDa ; utilisez des conditions de transfert adéquates et envisagez un enrichissement en protéines membranaires si le signal est faible.
• Ajoutez des inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation des échantillons pour préserver l'état de phosphorylation.
• Validez les performances de l'anticorps sur des lignées cellulaires humaines physiologiquement pertinentes ou des tissus cérébraux connus pour exprimer GRIN2B (par exemple SH-SY5Y, lysats d'hippocampe).
• Pour les applications ELISA, il peut être avantageux d'utiliser un phospho-peptide comme antigène de revêtement et de comparer la réactivité avec la forme non phosphorylée.

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