Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-GAB1 (Tyr659) pour WB, ELISA - Q13480

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la protéine GAB1 associée à GRB2

• GAB1 (GRB2-associated-binding protein 1) est une protéine adaptatrice d'échafaudage qui médie la signalisation en aval de multiples récepteurs à tyrosine kinase.
• Elle participe aux cascades de signalisation intracellulaire déclenchées par des récepteurs activés tels que FGFR1, EGFR et INSR.
• Impliquée spécifiquement dans la voie de signalisation MET/HGF. Références associées : PMID:29408807
• Membre de la famille des adaptateurs GAB, partageant des motifs structuraux comme un domaine d'homologie à la pléckstrine et de multiples sites de phosphorylation sur tyrosine qui recrutent des protéines contenant un domaine SH2.
• Fortement phosphorylée sur des résidus tyrosine (dont Y659) après activation du récepteur, ce qui est crucial pour son interaction avec les effecteurs en aval.
• Des mutations dans GAB1 sont liées à une surdité non syndromique (DFNB26), soulignant son rôle dans la fonction auditive.
• Subit une acétylation et un épissage alternatif, ce qui peut moduler son activité.
• Des informations sur la structure 3D sont disponibles, fournissant des aperçus de son architecture moléculaire.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique phosphorylé correspondant aux résidus entourant Tyr659 de la GAB1 humaine. Assurez-vous que votre système de détection est spécifique de la forme phosphorylée ; envisagez d'utiliser un anticorps non spécifique de la phosphorylation comme contrôle.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 77 kDa. Utilisez un pourcentage de gel et des conditions de transfert appropriés pour les protéines de cette gamme de masse. Validez la spécificité de la bande en utilisant des lysats traités à la phosphatase ou des inhibiteurs pertinents.
• Pour l'ELISA, l'anticorps peut être utilisé comme réactif de capture ou de détection ; l'optimisation des conditions de revêtement et de la concentration d'anticorps est recommandée. Incluez un peptide phosphorylé comme contrôle positif.
• La réactivité croisée a été démontrée avec la GAB1 humaine et murine. Lors de l'utilisation d'échantillons de souris, soyez conscient du bruit de fond potentiel dû aux immunoglobulines murines endogènes si vous utilisez des anticorps secondaires anti-lapin.
• Comme la GAB1 est impliquée dans de multiples voies de signalisation (EGFR, INSR, MET/HGF), envisagez une stimulation cellulaire appropriée avec des facteurs de croissance (par exemple, EGF, insuline, HGF) avant la préparation des échantillons pour induire la phosphorylation sur Tyr659.
• L'anticorps étant polyclonal de lapin, la cohérence entre les lots doit être vérifiée pour les applications quantitatives critiques.

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