Anticorps polyclonal de lapin Phospho-FOXO3A-S425 pour WB, IHC-P, ELISA - O43524

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la protéine Forkhead box O3

• La protéine Forkhead box O3 (FOXO3A), également connue sous le nom de protéine AF6q21 ou Forkhead in rhabdomyosarcoma-like 1 (FKHRL1), est un facteur de transcription exprimé de manière ubiquitaire, codé par le gène FOXO3 (ID de gène humain 2309).
• FOXO3A agit comme un activateur transcriptionnel qui reconnaît le consensus ADN 5'-[AG]TAAA[TC]A-3', régulant des processus clés comme l'apoptose et l'autophagie. Références associées : PMID:10102273, PMID:16751106, PMID:21329882
• En réponse à la privation de nutriments, FOXO3A entre dans le noyau après déphosphorylation et régule à la hausse les gènes de l'autophagie (par ex., GABARAP1L, MAP1LC3B, ATG12), favorisant la dégradation des protéines du muscle squelettique.
• FOXO3A déclenche l'apoptose en l'absence de facteurs de survie, causant notamment la mort des cellules neuronales sous stress oxydatif. Références associées : PMID:10102273, PMID:16751106
• Suite à la phosphorylation par MAPKAPK5, FOXO3A induit miR-34b et miR-34c, qui répriment post-transcriptionnellement l'expression de l'oncogène MYC. Références associées : PMID:21329882
• FOXO3A fait la navette entre le cytoplasme et le noyau, et sous stress métabolique, il se transloque vers la matrice mitochondriale et la membrane externe pour améliorer la transcription de l'ADN mitochondrial. Références associées : PMID:23283301
• Les modifications post-traductionnelles clés incluent la phosphorylation (par ex., au niveau Ser425), l'acétylation, la méthylation et l'ubiquitination, qui régissent son activité, sa localisation et sa stabilité.
• FOXO3A est impliqué dans la différenciation des lymphocytes T régulateurs en activant l'expression de FOXP3, et dans l'engagement chondrogénique des progéniteurs squelettiques dans des conditions de faible teneur en lipides. Références associées : PMID:30513302

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique entourant la sérine 425 ; pour préserver cette modification labile, ajoutez des inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation des échantillons.
• Pour le Western blot (WB), envisagez de charger un témoin positif tel qu'un lysat de cellules traitées avec un inducteur de la phosphorylation de FOXO3A (par ex., stress oxydatif ou privation de sérum) et validez la spécificité de la bande avec un échantillon traité par une phosphatase.
• L'immunohistochimie (IHC‑P) peut nécessiter une optimisation de la récupération antigénique ; incluez une étape de blocage avec des considérations phospho‑spécifiques pour réduire la liaison non spécifique.
• Les protocoles ELISA doivent utiliser les conditions de revêtement recommandées et inclure une courbe standard ; la réactivité croisée entre l'humain, la souris et le rat suggère que l'épitope est conservé, mais confirmez toujours les performances dans votre matrice d'intérêt.
• Le poids moléculaire protéique est d'environ 71 kDa ; vérifiez la détection à la taille attendue et tenez compte d'un éventuel décalage dû aux modifications post‑traductionnelles.

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