pAb de lapin Phospho-Filamine A-S2152 pour WB, ELISA - P21333

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la Filamine-A

• La Filamine-A (FLNA) est une protéine majeure de liaison à l'actine qui réticule les filaments d'actine en réseaux orthogonaux et les rattache aux glycoprotéines membranaires, servant d'échafaudage pour un large éventail de protéines de signalisation cytoplasmiques.
• Elle se localise au niveau du cortex cellulaire, du cytosquelette, du péricaryon et des projections cellulaires spécialisées telles que les cônes de croissance et les podosomes, où elle organise le cytosquelette d'actine.
• La Filamine-A est essentielle pour l'adhésion cellulaire, les contacts intercellulaires et la dynamique des jonctions adhérentes au cours du développement des vaisseaux sanguins, du cœur et du cerveau.
• Elle est nécessaire à l'effondrement du cône de croissance induit par SEMA3A lors du guidage axonal, reliant la signalisation des sémaphorines au remodelage de l'actine. Références associées : PMID:25358863
• La Filamine-A est exprimée de manière ubiquitaire et a un poids moléculaire d'environ 281 kDa ; plusieurs isoformes résultent de l'épissage alternatif, bien que ce produit cible un site de phosphorylation conservé dans la séquence canonique.
• La protéine est soumise à de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation, la formation de liaison isopépdique et la conjugaison à l'ubiquitine ; la phosphorylation au niveau du S2152 est un événement régulé dynamiquement.
• Les mutations de FLNA sont associées à un spectre de maladies humaines, notamment l'hétérotopie nodulaire périventriculaire, les syndromes otopalatodigitaux et la dysplasie valvulaire cardiaque.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène étant un phosphopeptide synthétique autour du S2152, ajoutez des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons pour préserver l'état de phosphorylation pour le Western blot.
• Vérifiez la spécificité de l'anticorps par compétition avec le peptide non phosphorylé ou en traitant les échantillons par la lambda phosphatase ; une perte de signal confirme la spécificité phospho.
• La grande taille de la Filamine-A (281 kDa) peut nécessiter des gels SDS-PAGE à faible pourcentage (par exemple 6 %) et des temps de transfert prolongés ; envisagez un transfert humide à 30 V pendant la nuit.
• Pour l'ELISA, envisagez d'associer cet anticorps phospho-spécifique à un anticorps anti-Filamine A total pour permettre la mesure du rapport phospho/total.
• La réactivité croisée est rapportée pour l'homme, la souris et le rat ; validez-la dans votre système tissulaire ou cellulaire spécifique si vous travaillez avec d'autres espèces.

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