Anticorps polyclonal de lapin Phospho-FAK-Y576/577 pour WB, ELISA - Q05397

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de FAK

• La kinase d'adhésion focale 1 (FAK, PTK2) est une protéine tyrosine kinase non réceptrice qui régule la migration cellulaire, l'adhésion, l'étalement et la réorganisation du cytosquelette d'actine.
• FAK joue un rôle essentiel dans le développement embryonnaire, l'angiogenèse, la migration des cardiomyocytes et le développement du système nerveux.
• L'isoforme 1 pleine longueur médie la signalisation depuis les intégrines, les récepteurs de facteurs de croissance et les GPCR, activant les voies PI3K/AKT et MAPK.
• L'isoforme 6 (FRNK) dépourvue du domaine kinase agit comme un inhibiteur dominant négatif de la phosphorylation et de la signalisation de FAK.
• FAK est localisée au niveau des adhésions focales, de la membrane cellulaire, du cytoplasme, des centrosomes et du noyau, indiquant une navette dynamique.
• La phosphorylation au niveau des Tyr576 et Tyr577 dans la boucle d'activation du domaine kinase est critique pour l'activité catalytique de FAK.
• FAK phosphoryle des substrats en aval comme NEDD9 (PubMed : 9360983) et SRC pour promouvoir l'assemblage de complexes de signalisation. Références associées : PMID:9360983
• Expression ubiquitaire ; détectée dans les lymphocytes B/T, les fibroblastes pulmonaires et les cellules épithéliales (PubMed : 31630787). Références associées : PMID:31630787

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique couvrant les Tyr576/Tyr577 ; la spécificité de l'anticorps dépend de l'état de phosphorylation.
• Ajoutez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse pour préserver les phospho-épitopes lors de la préparation des échantillons.
• Pour le Western blot, une bande majeure d'environ 119 kDa est attendue ; des bandes supplémentaires peuvent correspondre à une dégradation ou une réactivité croisée.
• Validez la détection dans des lignées cellulaires activées (par exemple, fibroblastes stimulés par intégrine) où la phosphorylation de FAK Y576/577 est induite.
• Pour l'ELISA, envisagez un revêtement avec l'immunogène phosphopeptidique ou utilisez des lysats cellulaires totaux ; incluez un peptide non phosphorylé comme contrôle négatif.

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