Anticorps polyclonal de lapin Phospho-FAK-Y397 pour WB, ELISA - Q05397

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la FAK

• La protéine kinase d'adhésion focale 1 (FAK, également appelée PTK2) est une protéine tyrosine kinase non réceptrice qui joue un rôle central dans la transduction du signal médiée par les intégrines, régulant la migration cellulaire, l'adhésion, l'étalement et la réorganisation du cytosquelette.
• Encodée par le gène PTK2, la FAK est essentielle pour le développement embryonnaire précoce, l'angiogenèse, la fonction des cardiomyocytes et le développement du système nerveux (croissance axonale, migration neuronale, formation des synapses).
• Après activation, la FAK s'autophosphoryle sur la Tyr397, ce qui crée un site de liaison à haute affinité pour les kinases de la famille SRC ; cet événement est essentiel pour l'assemblage de complexes de signalisation qui propagent des voies en aval comme PI3K/AKT et MAPK/ERK.
• Au niveau sous-cellulaire, la FAK se localise principalement dans les adhésions focales, mais aussi sur la membrane cellulaire, le cytoplasme périnucléaire, le cortex cellulaire, le cytosquelette, le centrosome, le corps basal du cil et le noyau, ce qui reflète ses rôles de signalisation variés.
• L'isoforme 6 (FRNK) ne possède pas de domaine kinase et fonctionne comme inhibiteur dominant-négatif de la signalisation de la FAK, atténuant l'accumulation nucléaire de LPXN et limitant la transcription génique dépendante de SRF.
• La FAK est largement exprimée ; détectée de manière ubiquitaire et particulièrement dans les cellules épithéliales, les lymphocytes B et T, et les fibroblastes pulmonaires. Références associées : PMID:31630787
• Les modifications post-traductionnelles clés comprennent la phosphorylation sur tyrosine (par exemple Y397), l'acétylation et l'ubiquitination, qui régulent son activité kinase, ses interactions protéiques et sa stabilité.
• Cet anticorps reconnaît spécifiquement la FAK phosphorylée sur Tyr397, permettant aux chercheurs de surveiller l'état d'activation de la FAK dans les études de signalisation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique autour de Tyr397 ; l'anticorps est supposé reconnaître spécifiquement la forme phosphorylée. Validez la spécificité en traitant les lysats avec une phosphatase ou en utilisant un blocage par peptide non phosphorylé.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 119 kDa. Utilisez des contrôles positifs appropriés (par exemple, cellules traitées au pervanadate pour induire la phosphorylation).
• Pour l'ELISA, pensez à revêtir les plaques avec le phosphopeptide et à utiliser un anticorps anti-FAK total comme contrôle de chargement.
• La réactivité croisée avec la souris et le rat est rapportée, mais réalisez des expériences de titration dans le système modèle concerné.
• Expédié dans des sacs de glace ; conserver à -20°C à réception pour une stabilité à long terme.

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