Ac mAb de lapin anti-Phospho-FAK-Y397 pour WB et ELISA - Q05397

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de FAK

• FAK (Focal Adhesion Kinase 1) est une protéine-tyrosine kinase non réceptrice codée par le gène PTK2, également appelée p125FAK ou pp125FAK. Elle agit comme médiateur central de la signalisation des intégrines, régulant l'adhésion cellulaire, la migration, la prolifération et la survie.
• Lors de son activation aux adhésions focales, FAK s'autophosphoryle sur la tyrosine 397, créant un site d'amarrage à haute affinité pour les kinases de la famille SRC et initiant des cascades de signalisation en aval critiques pour le remodelage du cytosquelette.
• FAK intègre les signaux de divers récepteurs, y compris les intégrines, les récepteurs des facteurs de croissance, les RCPG, EPHA2 et les récepteurs à la nétine, les couplant à des voies telles que PI3K/AKT et MAPK/ERK qui contrôlent la croissance et la différenciation cellulaires.
• Par une modulation localisée des GTPases de la famille Rho via les GEF et GAP, FAK orchestre la réorganisation du cytosquelette d'actine, l'étalement cellulaire et la formation de protrusions cellulaires.
• FAK phosphoryle directement NEDD9 (HEF1) lors de l'engagement des intégrines, contribuant à l'assemblage de complexes de signalisation en aval. Références connexes : PMID:9360983
• L'isoforme non catalytique 6 (FRNK) agit comme un inhibiteur dominant négatif de la signalisation FAK, atténuant l'accumulation nucléaire de LPXN et la transcription dépendante du facteur de réponse sérique.
• Au niveau subcellulaire, FAK se localise dynamiquement aux adhésions focales, au cortex cellulaire, au cytoplasme périnucléaire, aux centrosomes et au noyau, reflétant ses rôles multiples dans la transduction du signal et l'organisation structurelle.
• Les modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation sur plusieurs tyrosines, sérines et thréonines, ainsi que l'acétylation et l'ubiquitination, régulent étroitement l'activité, la stabilité et les interactions protéiques de FAK.
• Exprimé de manière ubiquitaire avec un enrichissement dans les cellules épithéliales, les lymphocytes et les fibroblastes pulmonaires, FAK est indispensable pour le développement embryonnaire, l'angiogenèse et la maturation du système nerveux.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène cible le résidu phosphorylé Y397 ; pour confirmer la spécificité phospho-spécifique en WB, envisagez de traiter les échantillons avec la lambda phosphatase ou d'incuber l'anticorps avec un peptide bloquant non phosphorylé.
• Pour les applications ELISA, l'utilisation du peptide phosphorylé comme témoin positif et de son homologue non phosphorylé comme témoin négatif peut aider à valider la spécificité du signal.
• FAK migre à environ 119 kDa sur SDS-PAGE ; assurez-vous d'utiliser un pourcentage de gel approprié et des temps de transfert prolongés pour les transferts de protéines de poids moléculaire élevé.
• Cet anticorps a été généré contre la séquence de FAK humaine ; la réactivité croisée avec d'autres espèces n'a pas été testée de manière approfondie. Validez dans votre système modèle spécifique s'il est utilisé en dehors d'échantillons humains.

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