Anticorps polyclonal de lapin Phospho-Ezrin-T567 pour WB - P15311

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'Ezrine

• L'Ezrine (également connue sous le nom de Cytovilline, Villine-2, p81) est une protéine de liaison du cytosquelette d'environ 69 kDa codée par le gène EZR (VIL2).
• Elle fonctionne comme un connecteur critique entre la membrane plasmique et le cytosquelette d'actine, jouant un rôle essentiel dans la formation des microvillosités épithéliales et des replis membranaires à la surface apicale de la cellule.
• Conjointement avec le facteur d'échange de nucléotides guanidiques PLEKHG6, l'ézrine est nécessaire pour la macropinocytose normale, un processus d'endocytose en phase fluide non sélective.
• Au niveau subcellulaire, l'ézrine se localise à la membrane cellulaire apicale, aux membranes des microvillosités et des replis, ainsi qu'au cortex cellulaire et au cytosquelette, reflétant son rôle dynamique dans le remodelage membrane-cytosquelette.
• L'expression tissulaire est prominente dans les microvillosités des cellules épithéliales intestinales et préférentiellement dans les astrocytes de l'hippocampe, du cortex frontal et d'autres régions cérébrales ; elle est faiblement exprimée ou absente dans les neurones de la plupart des tissus étudiés.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation (une marque de son activation), l'acétylation et la S-nitrosylation, contribuant toutes à sa polyvalence régulatrice dans les processus cellulaires tels que le maintien de la forme cellulaire, l'adhésion et la signalisation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Puisque cet anticorps est spécifique du phospho-site (T567), assurez-vous d'une inhibition complète des phosphatases lors de la lyse cellulaire/tissulaire (par exemple, en utilisant des cocktails d'inhibiteurs de phosphatases) pour préserver le signal de phosphorylation.
• Pour le Western blot, une bande à environ 69 kDa est attendue ; envisagez d'utiliser un témoin positif tel que des cellules traitées au pervanadate pour vérifier la spécificité du phospho-site.
• Pour confirmer la dépendance au phosphate du signal, traitez les échantillons avec la phosphatase lambda protéique ou effectuez des essais de compétition peptidique avec le peptide immunogène non phosphorylé.
• Bien qu'optimisé pour les échantillons humains, la réactivité croisée rapportée avec la souris et le rat suggère une forte conservation de la séquence ; validez l'anticorps dans votre système modèle spécifique en utilisant des témoins appropriés.
• Cet anticorps est recommandé uniquement pour le Western blot (WB) ; ses performances dans d'autres applications (par exemple, IHC, IF, IP) n'ont pas été évaluées et nécessiteraient une validation supplémentaire.

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