Anticorps polyclonal de lapin Phospho-EZH2/KMT6 (T311) pour WB, ELISA - Q15910

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'EZH2

• EZH2 est une histone-lysine N-méthyltransférase, aussi connue sous le nom d'homologue 2 de l'activateur de zeste, ENX-1 ou KMT6, et fonctionne comme sous-unité catalytique du complexe PRC2.
• Le complexe PRC2/EED-EZH2 méthyle l'histone H3 au niveau des Lys-9 et Lys-27, entraînant la répression transcriptionnelle des gènes cibles. Références associées : PMID:14532106, PMID:15225548, PMID:15385962
• EZH2 réalise la mono-, di- et triméthylation de H3K27, avec une préférence pour le substrat non méthylé (H3K27me0) et une activité progressivement plus faible sur H3K27me1 et H3K27me2. Références associées : PMID:15231737, PMID:17210787, PMID:18285464, PMID:22323599, PMID:30923826
• Dans les cellules souches embryonnaires, EZH2 est plus abondant que EZH1 et est essentiel pour établir les marques H3K27me3 requises pour l'identité des cellules souches et une différenciation correcte. Références associées : PMID:19026781
• Le complexe PRC2 peut recruter des ADN méthyltransférases, liant la méthylation des histones à la méthylation de l'ADN et renforçant le silence génique. Références associées : PMID:16357870, PMID:17200670
• Les gènes cibles connus réprimés par EZH2/PRC2 incluent HOXC8, HOXA9, MYT1, CDKN2A et les gènes répondant à l'acide rétinoïque. Références associées : PMID:16179254, PMID:18086877, PMID:20935635
• EZH2 méthyle également des protéines non histones comme le facteur de transcription GATA4 et le récepteur nucléaire RORA, élargissant son champ de régulation. Références associées : PMID:23063525
• Il régule les rythmes circadiens en méthylant l'histone H3 au niveau des promoteurs des gènes horloges, facilitant la répression médiée par CRY1/2 de la transcription de PER1/2.
• EZH2 est majoritairement localisé dans le noyau et est largement exprimé dans de nombreux tissus ; une surexpression est fréquemment observée dans les cancers du sein, du côlon, du larynx, les lymphomes et les cancers testiculaires. Références associées : PMID:14532106
• EZH2 est une phosphoprotéine, et la phosphorylation au niveau du résidu Thr311 est l'une des modifications post-traductionnelles qui peuvent réguler son activité.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène utilisé pour générer cet anticorps est un peptide synthétique portant une phosphorylation au niveau du Thr311 ; par conséquent, l'anticorps est supposé reconnaître spécifiquement la forme phosphorylée d'EZH2 sur ce site. Confirmez la spécificité en comparant les signaux dans des échantillons traités à la phosphatase et non traités.
• Pour le western blot (WB), EZH2 migre à environ 85 kDa. Utilisez des contrôles positifs appropriés comme les cellules HEK293T ou HeLa, et validez la détection de la forme phospho-T311 dans des conditions qui induisent la phosphorylation d'EZH2.
• L'ELISA peut être utilisée pour l'analyse quantitative des niveaux de phospho-EZH2 (T311) ; envisagez d'utiliser un anticorps de capture associé à ce pAb pour l'ELISA sandwich.
• Une réactivité croisée avec le rat a été observée ; par conséquent, cet anticorps peut être adapté pour les études sur modèles rongeurs. Validez-le dans le système de tissu ou de lignée cellulaire concerné pour garantir sa spécificité.

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