Anticorps polyclonal de lapin Phospho-ESRα-S167 pour WB, IF/ICC, ELISA - P03372

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du récepteur des œstrogènes Alpha

• Le récepteur des œstrogènes alpha (ER-alpha), codé par le gène ESR1, est un récepteur d'hormones stéroïdiennes et un membre de la sous-famille 3, groupe A des récepteurs nucléaires (NR3A1). Il fonctionne comme un facteur de transcription activé par un ligand, régulant l'expression des gènes critique pour la prolifération et la différenciation cellulaires dans les tissus cibles.
• Lors de la liaison de l'œstrogène, l'ER-alpha subit un changement conformationnel qui facilite l'homodimérisation et la liaison aux éléments de réponse aux œstrogènes (ERE) dans l'ADN. Il interagit également avec d'autres facteurs de transcription tels que AP-1 (c-Jun/c-Fos) et Sp1 pour médier une signalisation indépendante des ERE. Les complexes de coactivateurs sont recrutés via des motifs LXXLL.
• L'épissage alternatif et l'utilisation de promoteurs produisent des isoformes qui manquent d'un ou plusieurs domaines fonctionnels. Ces isoformes peuvent moduler l'activité transcriptionnelle du récepteur de pleine longueur par liaison compétitive à l'ADN ou au ligand, ou par hétérodimérisation. Références connexes : PMID:10970861
• L'ER-alpha effectue des navettes entre le noyau, le cytoplasme et la membrane cellulaire. Il est également associé à l'appareil de Golgi, permettant à la fois des voies de signalisation génomiques et non génomiques rapides, y compris l'activation de cascades kinases.
• Le récepteur est soumis à de multiples modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, la glycosylation, la palmitoylation et la conjugation de type ubiquitine. Il contient des motifs doigts de zinc et un domaine de liaison au ligand, avec un poids moléculaire d'environ 66 kDa.
• L'ER-alpha est largement exprimé dans les tissus humains mais est notablement absent dans la glande pituitaire. Références connexes : PMID:10970861
• Des rôles fonctionnels spécifiques incluent le maintien de la survie neuronale lors d'une blessure par reperfusion ischémique en présence d'estradiol, et l'activation de NOS3 pour promouvoir la production d'oxyde nitrique endothélial. Références connexes : PMID:21937726
• L'ER-alpha participe également à une transrépression mutuelle avec NF-kappa-B, modulant les réponses inflammatoires. De plus, il médie la régulation transcriptionnelle dépendante de MTA1 de BRCA1 et BCAS3. Références connexes : PMID:17922032

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'anticorps a été élevé contre un peptide phosphorylé synthétique autour de la Ser167. Utilisez des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons pour préserver la phosphorylation.
• Pour le western blot, la taille de bande prédite est d'environ 66 kDa. Validez la détection dans des lignées cellulaires humaines connues pour exprimer l'ER-alpha, telles que MCF-7.
• En immunofluorescence/ICC, prévoyez une localisation nucléaire, cytoplasmique et membranaire. Effectuez une coloration simultanée avec des marqueurs de compartiments pour confirmer la spécificité.
• En tant qu'anticorps polyclonal, la cohérence d'un lot à l'autre peut varier ; incluez des témoins positifs et négatifs, et envisagez un peptide bloquant pour la vérification de la spécificité phospho.
• Bien que l'anticorps soit réactif avec des échantillons humains, la réactivité croisée avec d'autres espèces n'a pas été testée ; une validation empirique est recommandée en cas d'utilisation orthologique.
• Pour ELISA, un antigène de revêtement peptidique phosphorylé peut aider à calibrer la sensibilité de détection.

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