Anticorps polyclonal de lapin Phospho-ERK1-T202 + ERK2-T185 pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P28482 / P27361

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'ERK1/ERK2

• ERK2 (MAPK1, également connu sous le nom de p42-MAPK) et ERK1 (MAPK3, p44-MAPK) sont les deux principales protéines kinases activées par des mitogènes qui constituent le cœur de la cascade de signalisation MAPK/ERK, transduisant les signaux extracellulaires pour réguler le destin cellulaire.
• La voie MAPK/ERK contrôle un large spectre de processus cellulaires, notamment la prolifération, la différenciation, l'adhésion, la survie et l'apoptose, en phosphorylant plus de 160 substrats en aval, tels que des facteurs de transcription (ex: ELK1, FOS, ATF2), des protéines kinases (ex: RSK, MSK, MNK) et des régulateurs du cytosquelette.
• Lors de l'activation, ERK1/2 phosphoryle GLI1 pour promouvoir sa dissociation de SUFU et sa translocation nucléaire, modulant ainsi positivement la signalisation smoothened.
  Références connexes : PMID:35831023
• En réponse à l'hypoxie, ERK2 phosphorylate la phosphoglycérate kinase PGK1, l'orientant vers la mitochondrie pour supprimer la production d'acétyl-CoA à partir du pyruvate.
  Références connexes : PMID:26942675
• La kinase se localise dans plusieurs compartiments sous-cellulaires : cytoplasme, noyau, cytosquelette (fuseau, centrosome), adhésions focales et cavéoles membranaires, permettant une signalisation dépendante du contexte.
• L'activation nécessite une double phosphorylation sur le motif Thr-Glu-Tyr (T185 et Y187 chez ERK2 ; T202 et Y204 chez ERK1) par les kinases MEK en amont ; cet anticorps détecte spécifiquement le T185 phosphorylé (ERK2) et le T202 phosphorylé (ERK1).
• Au-delà de son activité kinase, ERK2 fonctionne également comme un répresseur transcriptionnel en se liant aux éléments promoteurs riches en GC indépendamment de son activité catalytique, modulant les gènes répondant à l'interféron.
• Mots-clés : Acétylation, Épissage alternatif, Apoptose, Liaison à l'ATP, Cycle cellulaire, Jonction cellulaire, Cytoplasme, Cytosquelette, Liaison à l'ADN, Interaction hôte-virus, Kinase, Membrane, Liaison aux nucléotides, Noyau, Phosphoprotéine, Répresseur, Sérine/thréonine-protéine kinase, Transcription, Régulation de la transcription, Conjugaison Ubl.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour préserver la phosphorylation lors de la préparation des échantillons, incluez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse et évitez une manipulation prolongée des échantillons à température ambiante.
• Validez la spécificité de l'anticorps en traitant les lysats cellulaires avec la phosphatase lambda protéique ; attendez une perte totale du signal en Western blot.
• En IHC-P, optimisez les conditions de récupération de l'antigène (ex: tampon citrate pH 6,0) et envisagez d'utiliser un protocole d'amplification du signal spécifique du phospho-site pour améliorer la détection des cibles phosphorylées peu abondantes.
• Pour IF/ICC, fixez les cellules au formaldéhyde et perméabilisez au méthanol ; confirmez la colocalisation avec des marqueurs sous-cellulaires connus (ex: DAPI nucléaire, marqueurs de l'appareil de Golgi) en fonction de la localisation attendue après stimulation.
• Bandes attendues : ~38–43 kDa pour les isoformes ERK1/ERK2 ; plusieurs bandes peuvent apparaître en raison des états de phosphorylation ou des variants d'épissage.

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