Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-EPHA2-Y594 pour WB et ELISA - P29317

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'EPHA2

• EPHA2 code pour le récepteur 2 de l'éphrine de type A, un récepteur tyrosine kinase qui transduit des signaux lors de la liaison aux ligands éphrine-A liés à la membrane sur les cellules adjacentes, initiant une signalisation bidirectionnelle (vers l'avant via le récepteur et vers l'arrière via le ligand).
• Il régule divers processus cellulaires, notamment la migration cellulaire, l'adhésion médiée par les intégrines, la prolifération et la différenciation, en partie par la modulation de la voie de signalisation ERK1/ERK2.
• L'EPHA2 participe à des processus de développement tels que l'angiogenèse, la structuration du cerveau postérieur et la morphogenèse ramifiée dans la glande mammaire, et contribue à l'organisation et à la transparence des cellules des fibres du cristallin.
• Au-delà de la physiologie normale, l'EPHA2 agit comme un récepteur pour le virus de l'hépatite C (VHC) et le cytomégalovirus humain (HCMV), médiant l'entrée virale dans les cellules hôtes.
• La protéine est localisée au niveau de la membrane cellulaire avec un enrichissement dans les protrusions cellulaires dynamiques, notamment les membranes à volants, les lamellipodes et les adhérences focales, ce qui est cohérent avec ses rôles dans l'adhésion et la motilité cellulaires.
• L'EPHA2 est fortement exprimé dans les tissus riches en épithélium tels que la peau, l'intestin, le poumon et l'ovaire, et est également détecté dans les lignées cellulaires cérébrales et de gliome.
• Les caractéristiques structurelles clés comprennent un domaine extracellulaire de liaison à l'éphrine, un domaine transmembranaire à passage unique et un domaine kinase intracellulaire avec le résidu tyrosine phosphorylable Y594.
• L'EPHA2 est classé sous plusieurs mots-clés fonctionnels : tyrosine-protéine kinase, liaison à l'ATP, récepteur, glycoprotéine, épissage alternatif et angiogenèse, soulignant son rôle central dans la transduction du signal et la maladie.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique englobant le résidu Y594, ce qui devrait assurer une spécificité élevée pour la forme phosphorylée — confirmez la spécificité en traitant les échantillons avec de la λ-phosphatase avant le western blot.
• Pour le western blot, incluez des inhibiteurs de phosphatase pendant la lyse et envisagez d'utiliser des contrôles positifs tels que des cellules stimulées par l'éphrine-A1 ou des lignées cellulaires cancéreuses épithéliales connues pour surexprimer l'EPHA2.
• En raison de la réactivité croisée signalée avec le rat, cet anticorps peut être adapté aux études sur des modèles de rats ; cependant, validez la réactivité et la dilution optimale dans votre système d'échantillonnage spécifique.
• En ELISA, utilisez un format direct ou indirect avec un antigène de capture phospho-EPHA2 ; les conditions de dosage doivent être optimisées empiriquement pour la concentration de revêtement et la dilution de l'anticorps de détection.
• Notez que le poids moléculaire prédit de l'EPHA2 est d'environ 108 kDa — utilisez toujours des marqueurs de poids moléculaire appropriés et vérifiez la taille de la bande.

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