Phospho-eNOS-S1177 Lapin pAb pour WB, ELISA - P29474

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'eNOS

• La monoxyde d'azote synthase 3 (eNOS) est une enzyme spécifique de l'endothélium qui catalyse la production de monoxyde d'azote (NO), une molécule de signalisation clé dans le système cardiovasculaire.
• Le NO dérivé de l'eNOS induit la relaxation du muscle lisse vasculaire par une voie de transduction du signal médiée par le cGMP, jouant un rôle critique dans la régulation de la pression artérielle. Références connexes : PMID:1378832
• Le NO généré par l'eNOS médie également l'angiogenèse induite par le VEGF dans les vaisseaux coronaires et favorise l'activation des plaquettes, contribuant à l'hémostase.
• Un isoforme de l'eNOS issu d'un épissage alternatif manque d'activité catalytique et peut agir comme un régulateur dominant négatif en formant des hétérodimères avec l'enzyme complète active.
• L'eNOS se localise à la membrane cellulaire, aux cavéoles, au cytoplasme, au cytosquelette et à l'appareil de Golgi ; le ciblage membranaire est facilité par la myristoylation et la palmitoylation N-terminales.
• L'expression a été détectée dans les plaquettes, le placenta, le foie et le rein.
• L'eNOS est une phosphoprotéine dont l'activité est modulée par la phosphorylation, la liaison calcium/calmoduline et des cofacteurs tels que le FAD, le FMN, l'hème, le fer, le zinc et le NADP.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Lors de la réalisation d'un Western blot, incluez des inhibiteurs de phosphatases dans le tampon de lyse pour préserver les signaux de phosphorylation, et optimisez les conditions de blocage et de lavage pour les anticorps spécifiques aux phosphoprotéines.
• Pour la détection de la phosphorylation de l'eNOS sur Ser1177, la stimulation des cellules endothéliales par le VEGF ou l'exposition à un stress de cisaillement peut être employée ; cependant, la réponse doit être validée dans le système d'échantillon pertinent.
• En ELISA, assurez-vous que l'antigène de revêtement ou l'anticorps de capture est sélectionné de manière appropriée, et effectuez une titration pour déterminer les concentrations de travail optimales.
• Comme l'eNOS partage une homologie avec d'autres isoformes de NOS, la réactivité croisée doit être évaluée si elle est utilisée dans des systèmes avec une expression mixte d'isoformes.

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