pAb de lapin anti-Phospho-eIF4E-S209 - P06730

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de eIF4E

• Le facteur d'initiation de la traduction eucaryote 4E (eIF4E), également appelé sous-unité de 25 kDa d'eIF-4F et protéine de liaison à la coiffe de l'ARNm, est un régulateur clé de la synthèse protéique.
• Il reconnaît et se lie à la coiffe 7-méthylguanosine (m7G) de l'ARNm, induisant le déballage des structures secondaires pour faciliter la liaison du ribosome lors de l'initiation de la traduction (PubMed:16271312, PubMed:22578813).
  Références associées : PMID:16271312 PMID:22578813
• Il agit dans le noyau pour promouvoir l'exportation d'un sous-ensemble d'ARNm, stimulant la coiffage, le traitement et l'épissage des ARN (PubMed:11606200, PubMed:22578813, PubMed:22684010).
  Références associées : PMID:11606200 PMID:22578813 PMID:22684010
• Avec EIF4G1, il antagonise le scanning ribosomique et est nécessaire à la traduction dépendante de l'élément TISU (Initiateur de traduction des 5'UTR courts), qui contourne l'étape de scanning (PubMed:29987188).
  Références associées : PMID:29987188
• Dans le cytoplasme, il régule la traduction et la stabilité des ARNm ; dans les corps P, il médie le stockage des ARNm inactivement traduits, empêchant leur dégradation (PubMed:24335285).
  Références associées : PMID:24335285
• Il favorise l'export nucléaire d'ARNm spécifiques, notamment NOS2/iNOS (PubMed:23471078) et MDM2 (PubMed:22684010), influençant les réponses immunitaires et le contrôle du cycle cellulaire.
  Références associées : PMID:23471078 PMID:22684010
• Il se localise dans le cytoplasme, les corps P, les granules de stress, le noyau, les speckles nucléaires et les corps nucléaires, ce qui reflète ses rôles multiples.
• Il est modifié post-traductionnellement par phosphorylation et acétylation ; la dérégulation de eIF4E est associée aux troubles du spectre autistique et est exploitée par les virus pour leur synthèse protéique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique autour du résidu S209 ; vérifiez la spécificité par traitement à la phosphatase ou compétition par peptide non phosphorylé dans votre système d'essai.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire prédit est d'environ 25 kDa ; optimisez les conditions d'électrophorèse et de transfert, et envisagez l'utilisation de membranes à faible fluorescence pour réduire le bruit de fond.
• En ELISA, couplez cet anticorps avec un anticorps anti-eIF4E total pour quantifier les niveaux de phosphorylation ; validez la linéarité et la sensibilité dans la matrice de votre échantillon.
• La réactivité croisée est rapportée pour l'humain et la souris ; testez-la sur des lysats de votre espèce d'intérêt et ajustez la dilution de l'anticorps en conséquence.
• Pour la détection spécifique de la phosphorylation, assurez-vous que les échantillons sont préparés avec des inhibiteurs de phosphatases pour préserver l'état de modification.

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