Anticorps Polyclonal de Lapin Phospho-EGFR-Y869 pour WB et ELISA - P00533

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'EGFR

• L'EGFR est une récepteur tyrosine kinase qui se lie aux ligands de la famille EGF (y compris EGF, TGF-alpha, AREG, épigène, bétacelluline, épiréguline et HBEGF), entraînant la dimérisation du récepteur et son autophosphorylation. Références connexes : PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960 PMID:12297049 PMID:15611079 PMID:17909029

• L'EGFR activé par un ligand déclenche plusieurs cascades de signalisation intracellulaire, notamment les modules RAS-RAF-MEK-ERK, PI3 kinase-AKT, PLCgamma-PKC et STAT, ainsi que la signalisation NF-kappa-B. Références connexes : PMID:27153536 PMID:11116146

• L'EGFR phosphoryle directement d'autres protéines telles que RGS16 (améliorant son activité GTPase) et MUC1 (favorisant son interaction avec SRC et la bêta-caténine), reliant ainsi les voies des protéines G et de l'adhésion cellulaire. Références connexes : PMID:11602604 PMID:11483589

• L'EGFR régule positivement la migration cellulaire en interagissant avec CCDC88A/GIV, qui retient l'EGFR à la membrane cellulaire et maintient la signalisation. Références connexes : PMID:20462955

• Le gène EGFR (également connu sous le nom d'ERBB1, HER1) code un récepteur tyrosine kinase appartenant à la famille ERBB ; un isoforme issu d'un épissage alternatif (isoforme 2) peut agir comme un antagoniste de l'action de l'EGF et est exprimé dans les cancers ovariens.

• L'EGFR est principalement localisé à la membrane cellulaire mais est également détecté dans le réticulum endoplasmique, l'appareil de Golgi, la membrane nucléaire, les endosomes et peut être sécrété.

• L'EGFR est une phosphoprotéine avec des sites clés de phosphorylation tyrosine (y compris Y869) qui régulent son activité kinase, et subit une glycosylation, une ubiquitination et d'autres modifications post-traductionnelles.

• Exprimé de manière ubiquitaire dans les tissus humains ; l'EGFR agit comme un récepteur cellulaire hôte pour le virus de l'hépatite C (VHC), facilitant l'entrée virale dans les hépatocytes.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique correspondant aux résidus autour de Y869 de l'EGFR humain. Pour confirmer la spécificité au phospho, incluez des témoins traités à la phosphatase ou effectuez une compétition avec un peptide non phosphorylé.
• Pour le western blot, utilisez des lysats cellulaires stimulés par l'EGF et attendez une bande à ~134 kDa ; une réactivité croisée avec l'EGFR de souris et de rat a été rapportée, mais il faut valider dans l'espèce d'intérêt.
• Pour l'ELISA, envisagez de revêtir avec un peptide phosphorylé et d'optimiser les conditions de blocage et de détection pour améliorer le rapport signal/bruit.
• Évitez les conditions de décapage rigoureuses lors de la réhybridation des membranes, car cela pourrait éliminer le signal spécifique au phospho.

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