Phospho-EGFR-Y1197 Lapin pAb pour WB - P00533

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du récepteur du facteur de croissance épidermique (EGFR)

• L'EGFR est une récepteur tyrosine kinase qui se lie aux ligands de la famille EGF et active plusieurs cascades de signalisation, régissant la croissance cellulaire, la survie et la différenciation. Références associées : PMID:10805725 PMID:27153536 PMID:2790960
• La dimérisation induite par les ligands conduit à l'autophosphorylation sur des tyrosines clés ; la phosphorylation sur Y1197 crée un site d'ancrage pour GRB2. Références associées : PMID:27153536
• L'EGFR activé déclenche au moins quatre voies majeures : RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC et STATs. Références associées : PMID:27153536
• L'EGFR phosphoryle directement des substrats tels que RGS16 et MUC1, modulant la signalisation des protéines G et l'adhésion cellulaire. Références associées : PMID:11602604 PMID:11483589
• L'interaction avec CCDC88A/GIV favorise une rétention membranaire soutenue et la migration cellulaire. Références associées : PMID:20462955
• Un isoforme alternatif (isoforme 2) peut agir comme un antagoniste de la signalisation EGF.
• L'EGFR se trouve principalement à la membrane plasmique, mais trafique également vers les endosomes, l'appareil de Golgi, le réticulum endoplasmique et le noyau ; une forme sécrétée existe. Expression ubiquitaire, avec l'isoforme 2 également présente dans les cancers ovariens.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, utilisez des cocktails d'inhibiteurs de phosphatases pendant la lyse cellulaire pour préserver la phosphorylation sur Y1197.
• Validez la spécificité de l'anticorps en comparant les lysats cellulaires non traités et stimulés par EGF ; une augmentation substantielle de l'intensité de la bande autour de 134 kDa est attendue lors de l'activation.
• La protéine EGFR mature a un poids moléculaire prédit d'environ 134 kDa, mais les modifications post-traductionnelles telles que la glycosylation peuvent provoquer un décalage de mobilité ; utilisez des marqueurs de poids moléculaire appropriés et des témoins positifs.
• Comme point de départ général pour les anticorps polyclonaux phospho-spécifiques, envisagez de tester des dilutions entre 1:500 et 1:2000 ; optimisez selon vos conditions expérimentales spécifiques.

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