Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-EGFR (Y1148) pour WB, ELISA - P00533

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'EGFR

• L'EGFR est une récepteur tyrosine kinase qui se lie aux ligands de la famille de l'EGF (EGF, TGF-alpha, AREG, épigène, bétacelluline, épiréguline, HB-EGF) et déclenche la dimérisation du récepteur et l'autophosphorylation sur des résidus de tyrosine clés, notamment Y1148. Références connexes : PMID:10805725, PMID:27153536
• L'EGFR autophosphorylé sert de site d'ancrage pour les protéines adaptatrices telles que GRB2, activant des cascades de signalisation en aval : RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC et modules STAT. Il active également NF-kappa-B et phosphoryle directement RGS16 et MUC1, se couplant aux voies des protéines G et de la bêta-caténine. Références connexes : PMID:27153536, PMID:11116146, PMID:11602604, PMID:11483589
• L'EGFR régule positivement la migration cellulaire par son interaction avec CCDC88A/GIV, et contribue à l'apprentissage, à la mémoire et à la signalisation de la douleur. Références connexes : PMID:20462955
• L'isoforme 2 peut agir comme un antagoniste de l'action de l'EGF et est également exprimée dans les cancers ovariens ; dans l'ensemble, l'EGFR est exprimé de manière ubiquitaire.
• À l'échelle sous-cellulaire, l'EGFR réside dans la membrane cellulaire, le réticulum endoplasmique, l'appareil de Golgi, le noyau, les endosomes et est sécrété.
• Lors de l'infection virale, l'EGFR agit comme un récepteur pour le virus de l'hépatite C (VHC), médiant l'entrée en favorisant la formation du complexe CD81-CLDN1.
• Mots-clés : récepteur, tyrosine-protéine kinase, proto-oncogène, phosphoprotéine, glycoprotéine ; essentiel pour la transduction du signal et souvent dérégulé dans le cancer.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le Western blot, utilisez un marqueur de poids moléculaire approprié pour 134 kDa et incluez des lysats de contrôle positif provenant de lignées cellulaires humaines stimulées par l'EGF pour confirmer la spécificité phospho-spécifique.
• Vérifiez la dépendance à la phosphorylation en traitant les échantillons avec la phosphatase lambda avant le transfert ; la perte de signal confirme la liaison phospho-spécifique.
• Pour l'ELISA, envisagez de revêtir avec un peptide phosphorylé et des contrôles de peptide non phosphorylé pour évaluer la réactivité croisée ; optimisez la dilution de l'anticorps et les conditions de détection.
• Puisque cet anticorps est un polyclonal de lapin, un anticorps secondaire anti-lapin conjugué à la HRP est recommandé ; utilisez un blocage avec du BSA pour minimiser la liaison non spécifique.

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