pAb lapin Phospho-EGFR-Y1086 pour WB, ELISA - P00533

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'EGFR

• L'EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor), également désigné ErbB-1 ou HER1, est un membre de la famille ErbB des récepteurs tyrosine kinases. Il est largement exprimé dans l'épithélium et d'autres tissus. Un isoforme alternatif (isoforme 2) peut fonctionner comme antagoniste de l'action de l'EGF.
• L'EGFR se lie à plusieurs ligands de la famille de l'EGF, dont l'EGF, le TGF-α, l'amphiréguline et l'épigénine, ce qui induit la dimérisation du récepteur et l'autophosphorylation sur les résidus tyrosine cytoplasmiques. Références associées : PMID:10805725, PMID:27153536, PMID:2790960, PMID:12297049, PMID:15611079, PMID:17909029
• Après activation, l'EGFR recrute des protéines adaptatrices et stimule les principales cascades de signalisation telles que RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCγ-PKC et les voies STAT, régissant la prolifération, la survie et la différenciation. Références associées : PMID:27153536
• L'EGFR active également la signalisation NF-kappa-B et peut phosphoryler directement des protéines substrat telles que RGS16 (modulateur de la signalisation des protéines G), MUC1 (adhésion cellulaire/Wnt) et CCDC88A/GIV (promoteur de migration), reliant son activité à divers processus cellulaires. Références associées : PMID:11116146, PMID:11602604, PMID:11483589, PMID:20462955
• Au niveau sous-cellulaire, l'EGFR est principalement localisé sur la membrane cellulaire, mais il est également détecté dans le réticulum endoplasmique, l'appareil de Golgi, le noyau, les endosomes et peut être sécrété.
• Il est exprimé de manière ubiquitaire dans les tissus humains ; l'isoforme 2 est notamment exprimé dans les cancers de l'ovaire.
• (Infection microbienne) L'EGFR agit comme récepteur cellulaire hôte pour l'entrée du virus de l'hépatite C (VHC) dans les hépatocytes en facilitant la formation du complexe récepteur CD81-CLDN1.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène de cet anticorps est un phosphopeptide synthétique autour de Y1086 de l'EGFR humain, conçu pour reconnaître spécifiquement la forme phosphorylée.
• Pour le Western blot, préparez des lysats de lignées cellulaires humaines positives pour l'EGFR (par exemple A431 ou HeLa) avec et sans stimulation par l'EGF ; une bande à ~134 kDa confirme la détection.
• Pour l'ELISA, utilisez l'anticorps pour capturer ou détecter l'EGFR phosphorylé dans des lysats de cellules humaines ou des extraits de tissus ; optimisez les conditions de revêtement et de détection en fonction de votre plateforme de dosage.
• Veillez à inclure des cocktails d'inhibiteurs de phosphatases pendant la lyse et la manipulation des échantillons pour préserver le signal de phosphorylation.
• Comme la réactivité croisée est limitée à l'EGFR humain, validez l'anticorps dans vos systèmes d'échantillons humains.

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