Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-EGFR-Y1068 pour WB, IP, ELISA - P00533

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'EGFR

• L'EGFR (ErbB-1/HER1) est un membre de la famille des récepteurs tyrosine kinases ErbB qui médie la prolifération, la survie et la différenciation cellulaire après liaison du ligand.
• La dimérisation du récepteur induite par le ligand déclenche l'autophosphorylation sur des résidus tyrosine cytoplasmiques, dont Y1068, créant des sites d'amarrage pour des protéines adaptatrices telles que GRB2, qui activent des cascades en aval incluant RAS-RAF-MEK-ERK, PI3K-AKT, PLCgamma-PKC et les modules STAT. Références associées : PMID:27153536
• L'EGFR signale également via la voie NF-kappa-B et phosphoryle directement RGS16 et MUC1, modulant l'activité GTPase et l'adhésion cellulaire. Références associées : PMID:11116146, PMID:11602604, PMID:11483589
• L'isoforme 2 pourrait agir comme un antagoniste de l'action de l'EGF.
• La localisation subcellulaire comprend la membrane plasmique, les endosomes, le réticulum endoplasmique, l'appareil de Golgi et le noyau, une forme sécrétée ayant également été rapportée.
• L'EGFR est exprimé de manière ubiquitaire, l'isoforme 2 étant notamment trouvée dans les cancers de l'ovaire.
• Les modifications post-traductionnelles incluent la phosphorylation, la glycosylation, la méthylation, l'hydroxylation, la palmitoylation et l'ubiquitination, typiques d'un récepteur membranaire hautement régulé.
• Outre la physiologie normale, l'EGFR sert de récepteur cellulaire hôte pour l'entrée du virus de l'hépatite C (VHC).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le western blot (WB), utilisez des cocktails d'inhibiteurs de phosphatases pendant la lyse cellulaire pour préserver la phosphorylation. Une bande spécifique proche de 134 kDa est attendue. Confirmez la spécificité en pré-incubant l'anticorps avec le peptide immunogène phosphorylé ou en traitant les lysats avec de la phosphatase lambda.
• Pour l'immunoprécipitation (IP) et l'ELISA, validez la spécificité phospho à l'aide de contrôles appropriés ; un blocage par un peptide non phosphorylé ou un traitement à la phosphatase peut aider à différencier les signaux.
• La réactivité croisée avec la souris garantit l'applicabilité dans les modèles murins ; validez dans le système d'échantillon pertinent avant une utilisation extensive.

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