mAb de lapin anti-Phospho-DRP1-S616 - O00429

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de DRP1

• La protéine de type dynamine 1 (DNM1L), communément appelée DRP1, est un membre de la superfamille des dynamines des grandes GTPases ; elle est également connue sous les noms de DLP1, DVLP et Dymple.
• DRP1 médie la fission mitochondriale et peroxysomale en s'oligomérisant en structures tubulaires associées à la membrane qui s'enroulent autour des sites de scission, puis resserrent et coupent les membranes par un mécanisme dépendant de l'hydrolyse du GTP. Références associées : PMID:11514614, PMID:12499366, PMID:17301055, PMID:23530241, PMID:23584531, PMID:33850055
• Le recrutement de DRP1 sur les membranes mitochondriales est piloté par des récepteurs tels que MFF, MIEF1 et MIEF2 de manière dépendante du GTP ; l'hydrolyse ultérieure du GTP libère DRP1 et permet aux anneaux de filaments de se fermer et de couper la double membrane. Références associées : PMID:23283981, PMID:23921378, PMID:29899447
• DRP1 promeut la fission mitochondriale pendant la mitose et agit en aval de PINK1 dans une voie dépendante de PRKN ; sa phosphorylation rythmique au niveau du résidu Ser-637 contrôle la production circadienne d'ATP. Références associées : PMID:19411255, PMID:26992161, PMID:27301544, PMID:29478834, PMID:32484300
• DRP1 est nécessaire au développement normal du cerveau, y compris du cervelet, et est essentielle à la survie des neurones post-mitotiques en supprimant les dommages oxydatifs ; elle favorise également l'apoptose développementale pendant la formation du tube neural. Références associées : PMID:17460227, PMID:26992161, PMID:27145208
• Exprimée de manière ubiquitaire avec les niveaux les plus élevés dans le muscle squelettique, le cœur, les reins et le cerveau ; plusieurs isoformes présentent des profils tissu-spécifiques, notamment une isoforme 1 spécifique du cerveau et des isoformes 2 et 3 enrichies dans le testicule et le muscle squelettique.
• La localisation subcellulaire inclut la membrane externe mitochondriale, les peroxysomes, le cytosol, l'appareil de Golgi, les puits recouverts de clathrine et les membranes des vésicules synaptiques ; DRP1 est soumise à de nombreuses modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation, la S-nitrosylation et l'ubiquitination.

Conseils expérimentaux et recommandations techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique correspondant aux résidus autour du Ser-616 de la protéine DRP1 humaine. L'anticorps est censé reconnaître spécifiquement DRP1 uniquement lorsqu'il est phosphorylé au niveau de ce site.
• Pour le western blot, nous recommandons d'utiliser des inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation des échantillons pour préserver le signal de phosphorylation S616, et de valider la bande au niveau du poids moléculaire prédit de 82 kDa dans votre système expérimental.
• En immunoprécipitation, titrez la quantité d'anticorps et utilisez des tampons de lyse optimisés pour conserver l'épitope phosphorylé ; confirmez la spécificité par des contrôles de traitement à la phosphatase.
• Pour les applications ELISA, y compris les tests de peptide compétitifs, la réactivité de l'anticorps doit être vérifiée vis-à-vis du peptide phosphorylé par rapport au peptide non phosphorylé pour garantir la phospho-spécificité.

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