Phospho-DNA-PKcs-S2056 Lapin pAb pour WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P78527

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la DNA-PKcs

• La DNA-PKcs (PRKDC) sert de sous-unité catalytique du complexe de l'ADN-protéine kinase dépendante de l'ADN, agissant comme un capteur moléculaire des dommages à l'ADN et jouant un rôle central dans la réparation par jonction d'extrémités non homologues (NHEJ) des cassures double brin et dans la recombination V(D)J. Références associées : PMID:11955432 PMID:12649176 PMID:14734805
• Elle se localise aux extrémités des chromosomes, contribuant au maintien de la stabilité télomérique et à la prévention de la fusion des extrémités chromosomiques.
• Au-delà de la réparation de l'ADN, la DNA-PKcs module la transcription, favorise la biogenèse des ribosomes en traitant l'ARNr précurseur, et régule les réponses immunitaires innées via la voie cGAS-STING. Références associées : PMID:11955432 PMID:12649176 PMID:14734805 PMID:32103174 PMID:28712728 PMID:33273464 PMID:35460603
• Elle phosphoryle la Ser-139 de l'histone H2AX, un événement clé dans la réponse aux dommages de l'ADN, et de nombreux autres substrats dont p53, AKT, XRCC4 et WRN, influençant ainsi l'apoptose et la signalisation cellulaire. Références associées : PMID:14627815 PMID:16046194 PMID:10026262 PMID:10467406 PMID:11889123 PMID:15262962
• Principalement une protéine nucléaire, la DNA-PKcs se trouve également dans le nucléole et le cytosol, reflétant ses divers rôles fonctionnels.
• Sujette à la phosphorylation, l'acétylation et l'ubiquitination ; les mutations de PRKDC sont associées à un déficit immunitaire combiné sévère (SCID).

Guide expérimental et conseils techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique couvrant la Ser2056 de la DNA-PKcs humaine, conçu pour assurer la spécificité de l'état de phosphorylation. Inclure des contrôles phospho-négatifs appropriés lors de la validation.
• Pour le Western blot, en raison du poids moléculaire très élevé de la DNA-PKcs (469 kDa), envisagez d'utiliser des gels à faible pourcentage (par exemple, 4–8 %) et des temps de transfert prolongés. Utilisez des marqueurs de poids moléculaire élevé pré-colorés pour une visualisation claire.
• En immunofluorescence ou immunohistochimie, anticipez une forte coloration nucléaire ainsi que des signaux nucléolaires et cytoplasmiques possibles. Optimisez les protocoles de fixation et de perméabilisation pour préserver l'épitope phospho.
• La réactivité croisée est rapportée pour l'humain ; si vous testez d'autres espèces, confirmez l'homologie de séquence autour de Ser2056 et effectuez une expérience pilote.

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