Anticorps Polyclonal de Lapin Phospho-Cycline E1-T395 pour WB, IF/ICC, ELISA - P24864

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de la Cycline E1

• La Cycline E1 est une cycline G1/S-spécifique essentielle pour le contrôle du cycle cellulaire à la transition G1/S. Elle se complexe avec et active la kinase dépendante des cyclines 2 (CDK2), favorisant la progression de la phase G1 à la phase S.
• Elle appartient à la famille des cyclines, un groupe de protéines régulatrices dont la concentration oscille pendant le cycle cellulaire et qui régissent les points de contrôle clés.
• La protéine se localise principalement dans le noyau, ce qui est cohérent avec son rôle dans la régulation de la transcription et de la machinerie du cycle cellulaire.
• Son expression tissulaire est la plus élevée dans les testicules et le placenta, avec de faibles niveaux dans les cellules épithéliales bronchiques, reflétant sa fonction dans les tissus proliférants.
• Les modifications post-traductionnelles comprennent la phosphorylation sur plusieurs résidus (comme T395), l'ubiquitination et une potentielle sumoylation, qui modulent la stabilité et l'activité de la protéine.
• L'épissage alternatif génère des isoformes avec une régulation distincte et des fonctions potentiellement spécifiques à certains tissus.
• Le poids moléculaire calculé est d'environ 47 077 Da (UniProt), cohérent avec la bande observée d'environ 47 kDa en western blot.
• Les annotations UniProt mettent en lumière son implication dans la division cellulaire, la régulation des kinases dépendantes des cyclines et son identification en protéomique, soulignant son importance dans la prolifération des cellules normales et cancéreuses.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène est un peptide phospho-synthétique entourant T395, ce qui rend cet anticorps idéal pour détecter spécifiquement la Cycline E1 phosphorylée sur ce résidu. Pour confirmer la spécificité phospho, envisagez de traiter les échantillons avec de la λ-phosphatase ou d'utiliser un blocage par peptide non phosphorylé.
• En western blot, une bande autour de 47 kDa est attendue ; cependant, validez le poids moléculaire dans votre système d'échantillon spécifique, car les modifications post-traductionnelles peuvent déplacer la migration.
• Pour l'immunofluorescence/immunocytochimie, prévoyez une coloration nucléaire. Incluez un marquage de contre-coloration nucléaire comme le DAPI pour vérifier la localisation, et utilisez des conditions de fixation/permeabilisation appropriées pour préserver les épitopes phospho.
• Lorsqu'il est appliqué en ELISA, l'anticorps peut capturer ou détecter la phospho-Cycline E1 dans des lysats ; optimisez les étapes de revêtement et de détection pour votre format de dosage.
• La réactivité croisée est rapportée pour l'humain, la souris et le rat ; si vous utilisez d'autres espèces, effectuez un alignement de séquences autour de T395 et une validation préliminaire.

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