Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-Cycline D1 (T286) pour WB, IHC-P, ELISA - P24385

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la cycline D1

• La cycline D1 (CCND1) est une cycline spécifique de la phase G1/S, également connue sous le nom de protéine du lymphome à cellules B 1 (BCL-1) et d'oncogène PRAD1.
• Elle fonctionne comme la sous-unité régulatrice du complexe cycline D1-CDK4, qui phosphoryle les protéines de la famille du rétinoblastome (RB) pour libérer les facteurs de transcription E2F, favorisant ainsi la transition G1/S. Références associées : PMID:1827756, PMID:1833066, PMID:19412162
• De plus, la cycline D1 agit comme un substrat pour SMAD3, réprimant l'activité transcriptionnelle de SMAD3 ; elle forme un complexe ternaire avec CDK4 et CDKN1B pour l'importation nucléaire ; et exerce une activité corépressive avec INSM1 sur les promoteurs indépendamment du cycle cellulaire. Références associées : PMID:15241418, PMID:9106657, PMID:16569215, PMID:18417529
• Au niveau subcellulaire, la cycline D1 se trouve dans le noyau, le cytoplasme et la membrane nucléaire.
• Modifications post-traductionnelles : La cycline D1 est une phosphoprotéine, présentant des caractéristiques documentées de liaison isopeptidique et de conjugaison de type ubiquitine.
• La cycline D1 est un régulateur clé du cycle cellulaire et un proto-oncogène, impliqué dans le cancer par le biais de réarrangements chromosomiques.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps est produit contre un phosphopeptide synthétique correspondant aux résidus entourant la Thr-286 de la cycline D1 humaine ; considérez sa pertinence pour détecter la cycline D1 phosphorylée endogène dans des cellules stimulées ou en cycle.
• Pour le Western Blot, une bande majeure autour de 34 kDa est attendue ; l'inclusion d'inhibiteurs de phosphatase dans le tampon de lyse est recommandée pour préserver les signaux de phosphorylation.
• En immunohistochimie (IHC-P), les conditions optimales de récupération d'antigène et de blocage doivent être optimisées ; la spécificité de la phosphorylation peut être confirmée par un traitement à la phosphatase ou par une compétition avec un peptide phospho-bloquant.
• Les applications ELISA peuvent nécessiter un titrage des concentrations d'anticorps et d'antigène ; validez la spécificité du test avec des contrôles peptidiques non phosphorylés.
• La réactivité croisée est indiquée pour les échantillons humains, murins et de rat ; cependant, l'alignement de séquence de l'immunogène avec les espèces cibles est conseillé pour confirmer la conservation.

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