Phospho-Chk1-S345 Rabbit mAb pour WB, ELISA - O14757

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Phospho-Chk1-S345

• La sérine/thréonine-protéine kinase Chk1, codée par le gène CHEK1, est également connue sous le nom d'homologue de point de contrôle CHK1, kinase du point de contrôle du cycle cellulaire et checkpoint kinase-1.
• Nécessaire pour l'arrêt du cycle cellulaire médié par les points de contrôle et l'activation de la réparation de l'ADN en réponse à des dommages à l'ADN ou à de l'ADN non répliqué. Références connexes : PMID:11535615 PMID:12399544 PMID:12446774
• Se lie et phosphoryle CDC25A, CDC25B et CDC25C, créant des sites de liaison 14-3-3 qui inhibent leur activité phosphatase et favorisent la dégradation de CDC25A, bloquant finalement la progression du cycle cellulaire. Références connexes : PMID:9278511 PMID:12676583 PMID:12676925 PMID:12759351 PMID:19734889 PMID:20090422
• Phosphoryle RAD51 au Thr-309, favorisant sa libération de BRCA2 et renforçant l'association à la chromatine pour la réparation par recombinaison homologue. Références connexes : PMID:15665856
• Phosphoryle plusieurs sites C-terminaux de TP53, facilitant son activation dépendante de l'acétylation pour induire l'arrêt du cycle cellulaire. Références connexes : PMID:10673501 PMID:15659650 PMID:16511572
• Phosphoryle également NEK6, TLK1, FANCE, SPRTN et PABIR1/FAM122A, contribuant à divers processus tels que l'assemblage de la chromatine, la réparation des ponts inter-brins de l'ADN et la réponse au stress de réplication. Références connexes : PMID:18728393 PMID:12660173 PMID:12955071 PMID:17296736 PMID:31316063 PMID:33108758
• Se localise principalement dans le noyau et sur les chromosomes, mais se trouve également dans le cytoplasme, le cytosquelette et le centrosome.
• Exprimé de manière ubiquitaire, avec les niveaux les plus élevés dans le thymus, les testicules, l'intestin grêle et le côlon.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• La conception de l'immunogène utilise un peptide phosphorylé synthétique autour de la Ser345 du Chk1 humain ; confirmez la spécificité en traitant les lysats avec la phosphatase lambda pour abolir le signal.
• Pour le western blot, envisagez d'utiliser des agents inducteurs de dommages à l'ADN (par exemple, étoposide, hydroxyurée) pour enrichir le Phospho-Chk1-S345 dans des lignées cellulaires humaines ou murines.
• L'ELISA peut être effectuée avec du peptide capturé ou des lysats ; incluez un peptide non phosphorylé comme témoin négatif pour vérifier la spécificité phospho-spécifique.
• La réactivité croisée d'espèces est rapportée pour l'humain et la souris ; validez les performances dans l'espèce cible avant les études à grande échelle.

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