Anticorps polyclonal de lapin Phospho-CGAS (S420) pour WB et ELISA - Q8C6L5

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CGAS

• CGAS (cyclic GMP-AMP synthase) est une nucléotidyltransférase qui catalyse la formation de 2',3'-cGAMP à partir de l'ATP et du GTP, un second messager essentiel pour l'immunité innée. Références associées : PMID:23258413 PMID:23647843 PMID:23722158

• Il agit comme un capteur d'ADN cytosolique clé : il se lie directement à l'ADN double brin pour induire des gouttelettes liquides qui activent CGAS, entraînant la production d'interféron de type I dépendante de STING1. Références associées : PMID:23722158 PMID:28095500 PMID:28314590

• Il se lie préférentiellement aux longs ADN double brin (environ 45 pb) et forme des réseaux en échelle qui stabilisent coopérativement les complexes cGAS-ADNdb. Références associées : PMID:28902841

• Il détecte l'ADN étranger provenant de virus, rétrovirus et bactéries, et détecte également l'ADN endogène propre qui fuit lors de stress cellulaires (par exemple, stress mitochondrial, sénescence, formation de micronoyaux). Références associées : PMID:23258413 PMID:23647843 PMID:23722158 PMID:23929945 PMID:28738408 PMID:28759028

• Le 2',3'-cGAMP peut se transférer vers les cellules voisines via des jonctions gap ou des particules virales, propagant l'immunité antivirale. Références associées : PMID:24077100 PMID:26229117 PMID:31992625

• Dans les cellules saines, la CGAS nucléaire est maintenue inactive par liaison à la chromatine, ce qui prévient l'auto-immunité ; cependant, elle supprime également la réparation de l'ADN par interaction avec PARP1. Références associées : PMID:30356214 PMID:31544964 PMID:31808743 PMID:32911480 PMID:32911481 PMID:35210392

• La localisation subcellulaire inclut le noyau, les chromosomes, le cytoplasme, le cytosol et la membrane cellulaire. La protéine est soumise à de multiples modifications post-traductionnelles telles que la phosphorylation, l'acétylation et la palmitoylation, qui régulent son activité et sa localisation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique autour de la sérine 420 de la CGAS de souris. Cette conception garantit la spécificité pour la forme phosphorylée. Envisagez un traitement à la phosphatase sur les échantillons pour confirmer la phospho-spécificité en Western blot.
• Pour le Western blot (WB), une bande d'environ 58 kDa est attendue d'après le poids moléculaire prédit. Validez la dilution de l'anticorps et les temps d'exposition dans votre système d'échantillons.
• Pour l'ELISA, associez-le à un anticorps de détection approprié et optimisez les concentrations d'antigène de revêtement et d'anticorps. Testez la réactivité croisée avec la CGAS humaine et de rat pour confirmer la réactivité.
• Réalisez des contrôles appropriés (cellules non stimulées vs stimulées, lysats traités à la phosphatase) pour garantir que le signal détecté est dépendant de la phosphorylation.

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