Anticorps monoclonal lapin Phospho-CEBPB (T235) pour WB, IHC-P, ELISA - P17676

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CEBPB

• CEBPB (C/EBP-beta, NF-IL6, TCF-5) est un membre de la famille des facteurs de transcription CCAAT/enhancer-binding et agit comme un régulateur essentiel des réponses immunitaires et inflammatoires, de l'adipogenèse, de la régénération hépatique et de l'hématopoïèse. Références associées : PMID:12048245, PMID:1741402, PMID:18647749

• La protéine se lie au motif consensus d'ADN 5'-T[TG]NNGNAA[TG]-3' et régule la transcription des gènes de phase aiguë et des gènes codant pour les cytokines, jouant un rôle central dans la réponse inflammatoire et l'élimination des bactéries intracellulaires.

• Au cours de l'adipogenèse, CEBPB est exprimé rapidement et, après phosphorylation, induit CEBPA et PPARG, qui stimulent l'expression des gènes spécifiques des adipocytes. La transactivation retardée semble nécessaire pour permettre l'expansion clonale mitotique et la différenciation terminale. Références associées : PMID:20829347

• L'isoforme LIP agit comme un régulateur dominant négatif via hétérodimérisation avec l'isoforme LAP. CEBPB favorise également la différenciation des ostéoblastes et l'ostéoclastogenèse. Références associées : PMID:11741938

• CEBPB est principalement localisé dans le noyau, mais peut également être détecté dans le cytoplasme, ce qui est cohérent avec son rôle de navette dans l'activation transcriptionnelle dépendante du signal.

• Les modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation, l'acétylation, la méthylation et l'ubiquitination, modulent son activité transcriptionnelle et la stabilité de la protéine.

• L'expression tissulaire est large mais faible ; des niveaux détectables sont observés dans le poumon, le rein et la rate.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps monoclonal lapin recombinant a été généré contre un peptide phosphorylé synthétique autour de la thréonine 235. Confirmez la phospho-spécificité par traitement des échantillons à la phosphatase ou par inhibition compétitive avec un peptide non phosphorylé dans votre système d'essai.
• Pour le Western blot, attendez une bande majeure autour de 36 kDa. Utilisez des lysats fraîchement préparés et des inhibiteurs de phosphatases pour préserver le signal de phosphorylation. Optimisez les conditions de blocage et d'incubation de l'anticorps pour minimiser la liaison non spécifique.
• Dans les applications IHC-P, la méthode de récupération d'antigène et les conditions de fixation peuvent affecter l'intégrité du phospho-épitope. Envisagez de tester des tissus contrôles positifs connus, tels que les macrophages stimulés par le lipopolysaccharide (LPS) ou les adipocytes en cours de différenciation, pour valider la coloration.
• Pour l'ELISA, incluez à la fois des contrôles de peptide phosphorylé et non phosphorylé pour établir la spécificité de l'essai et la gamme dynamique.

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