Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-CDK1-Y15 pour WB, ELISA - P06493

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la CDK1

• La kinase dépendante des cyclines 1 (CDK1), également connue sous le nom de CDC2 ou protéine kinase p34, est une sérine/thréonine-protéine kinase qui joue un rôle central dans le cycle cellulaire eucaryote, favorisant la transition G2-M et l'entrée en mitose (PubMed:16407259, PubMed:16933150, PubMed:17459720). Références associées : PMID:16407259 PMID:16933150 PMID:17459720
• Elle phosphoryle un large éventail de substrats—incluant les lamines, l'histone H1, la protéine tau et la vimentine—pour orchestrer la séparation des centrosomes, la rupture de l'enveloppe nucléaire et la condensation des chromosomes (PubMed:16407259, PubMed:16933150, PubMed:17459720, PubMed:18480403, PubMed:20360007, PubMed:2188730). Références associées : PMID:16407259 PMID:16933150 PMID:17459720 PMID:18480403 PMID:20360007 PMID:2188730
• L'activité de la CDK1 est finement régulée par phosphorylation/déphosphorylation sur Thr14 et Tyr15. La phosphorylation sur Tyr15, médiée par WEE1 et PKMYT1, inhibe la CDK1, tandis que les phosphatases CDC25 éliminent ce phosphate inhibiteur pour déclencher l'entrée en mitose (PubMed:18480403, PubMed:20360007, PubMed:2188730, PubMed:20395957). Références associées : PMID:18480403 PMID:20360007 PMID:2188730 PMID:20395957
• En réponse à des dommages à l'ADN, la CDK1 est phosphorylée sur Tyr15 et inhibée, conduisant à un arrêt en phase G2 pour la réparation de l'ADN ; la phosphatase WIP1 réactive la CDK1 une fois la réparation terminée (PubMed:20360007, PubMed:20395957). Références associées : PMID:20360007 PMID:20395957
• La CDK1 se localise dans le noyau, le cytoplasme, les mitochondries, le centrosome et le fuseau mitotique, reflétant ses multiples rôles dans la mitose.
• Elle est retrouvée à des niveaux élevés dans les tissus de cancer du sein, ce qui en fait une cible potentielle pour le diagnostic et la thérapie.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique englobant la Tyr15 de la CDK1 humaine ; par conséquent, l'anticorps reconnaît spécifiquement la forme phosphorylée.
• Pour le Western blot, attendez-vous à un signal à ~34 kDa. Utilisez des inhibiteurs de phosphatases dans le tampon de lyse pour préserver la phosphorylation.
• La spécificité peut être vérifiée en traitant les échantillons avec la phosphatase lambda ou en réalisant des tests de compétition par peptide avec le peptide phosphorylé et non phosphorylé.
• Cet anticorps est validé pour les échantillons humains ; la réactivité croisée avec d'autres espèces n'a pas été déterminée.
• Pour l'ELISA, envisagez d'utiliser le phosphopeptide comme antigène de capture et un anticorps anti-CDK1 totale pour la détection afin de normaliser.

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