Phospho-CDK1-T14 mAb de lapin pour WB, ELISA - P06493

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de CDK1

• La kinase 1 dépendante des cyclines (CDK1), également connue sous le nom de CDC2, CDC28A ou P34CDC2, est un régulateur maître du cycle cellulaire eucaryote.
• Elle joue un rôle clé dans le contrôle de la transition G2-M en s'associant aux cyclines et en phosphorylant de nombreux substrats essentiels à la mitose, notamment les protéines impliquées dans la séparation des centrosomes, la dégradation de l'enveloppe nucléaire et la condensation des chromosomes (PubMed:16407259, PubMed:16933150, PubMed:17459720). Références associées : PMID:16407259 PMID:16933150 PMID:17459720
• Elle phosphoryle les lamines (LMNA, LMNB1, LMNB2) au début de la mitose, déclenchant le désassemblage de l'enveloppe nucléaire (PubMed:2188730, PubMed:2344612, PubMed:37788673). Références associées : PMID:2188730 PMID:2344612 PMID:37788673
• Son activité est étroitement régulée par phosphorylation : la phosphorylation inhibitrice au niveau de Thr14 (et Tyr15) par WEE1 et PKMYT1 est inversée par les phosphatases CDC25 pour activer CDK1 et favoriser l'entrée en mitose (PubMed:18480403, PubMed:20360007). Références associées : PMID:18480403 PMID:20360007
• Elle se localise dans le noyau, le cytoplasme, le centrosome, le fuseau mitotique et les mitochondries, ce qui témoigne de son rôle dynamique tout au long de la division cellulaire.
• En réponse à des dommages à l'ADN, CDK1 est inhibée par la phosphorylation médiée par PKR/EIF2AK2 et WEE1 pour interrompre le cycle cellulaire au point de contrôle G2, facilitant la réparation de l'ADN (PubMed:20360007). Références associées : PMID:20360007
• Elle phosphoryle Bcl-xL/BCL2L1 pour déclencher l'apoptose après un arrêt prolongé en phase G2 suite à des dommages à l'ADN (PubMed:19917720). Références associées : PMID:19917720
• Elle agit comme récepteur pour l'entrée du virus de l'hépatite C (VHC) dans les hépatocytes, bien que sa fonction principale soit le contrôle du cycle cellulaire.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour l'immunoblotting (WB), utilisez un tampon de lyse phospho-spécifique additionné d'inhibiteurs de phosphatases pour préserver la phosphorylation de CDK1 au niveau de Thr14.
• La taille attendue de la bande est d'environ 34 kDa ; confirmez avec des marqueurs de poids moléculaire et des contrôles de charge appropriés.
• La spécificité de l'anticorps pour le site de phosphorylation Thr14 peut être validée en traitant les lysats avec de la protéine phosphatase lambda ou par blocage avec le peptide immunogène phosphorylé.
• Cet anticorps monoclonal de lapin est adapté pour l'ELISA ; envisagez des formats directs ou sandwich selon la conception de votre essai.
• La réactivité croisée est rapportée pour l'humain et la souris ; réalisez une validation dans votre système de lignée cellulaire ou tissulaire concerné.

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