Phospho-BRD4-T249 Rabbit pAb pour WB - O60885

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de BRD4

• BRD4 (protéine 4 contenant un domaine bromo, également connue sous le nom de HUNK1) est une lectrice de chromatine qui reconnaît et se lie aux histones acétylées, jouant un rôle clé dans la transmission de la mémoire épigénétique lors des divisions cellulaires et la régulation de la transcription. Références associées : PMID:20871596 PMID:23086925 PMID:23317504
• Elle reste associée à la chromatine acétylée tout au long du cycle cellulaire, préservant l'état de la chromatine acétylée et maintenant la structure chromatinienne d'ordre supérieur pour la transcription des gènes en phase G1 post-mitotique. Références associées : PMID:22334664 PMID:23317504 PMID:23589332
• Pendant l'interphase, BRD4 régule la transcription des gènes inductibles par le signal en recrutant le complexe P-TEFb vers les promoteurs et les activateurs distaux, facilitant la phosphorylation du CTD de l'ARN polymérase II et l'élongation productive. Références associées : PMID:16109376 PMID:16109377 PMID:19596240
• BRD4 se lie à RELA acétylée pour activer la signalisation NF-kappa-B, et après phosphorylation par CK2, est recrutée vers les promoteurs cibles de p53/TP53 pour réguler la transcription médiée par p53. Références associées : PMID:19103749 PMID:23317504
• Dans la réponse aux dommages à l'ADN, BRD4 agit comme un isolateur de chromatine en recrutant le complexe condensine-2 vers les histones acétylées, limitant la propagation de la phosphorylation de l'histone H2AX.
• Exprimée de manière ubiquitaire et localisée dans le noyau et la chromatine.
• Modifiée post-traductionnellement par acétylation et phosphorylation ; contient deux domaines bromo ; impliquée dans des réarrangements chromosomiques liés au cancer ; interagit avec des protéines virales.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique autour de la Thr249 de la BRD4 humaine. Pour confirmer la spécificité de la phosphorylation, envisagez d'utiliser un anticorps BRD4 non spécifique de la phosphorylation comme témoin lors d'expériences parallèles.
• Pour le transfert de type Western (WB), une bande d'environ 152 kDa est attendue. Utilisez un pourcentage de gel approprié (par exemple, 8 % de polyacrylamide) et optimisez les conditions de transfert pour les protéines de poids moléculaire élevé.
• Validez l'anticorps dans une lignée cellulaire pertinente (par exemple, HeLa, Jurkat) avec un statut de phosphorylation BRD4 connu. Incluez des cocktails d'inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse pour préserver les signaux de phosphorylation.
• Puisqu'une réactivité croisée est signalée pour la souris et le rat, cet anticorps peut convenir aux études sur des modèles de rongeurs ; incluez des témoins positifs spécifiques à l'espèce appropriée pour vérification.

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