Anticorps polyclonal de lapin anti-Phospho-Beclin 1 (Ser15) pour WB et ELISA - Q14457

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Beclin-1

• Beclin-1 (également connue sous le nom de protéine d'interaction avec BCL2 de type myosine en hélice alpha, ATG6 ou VPS30) est une protéine centrale de l'autophagie codée par le gène BECN1.
• Beclin-1 est une protéine autophagique centrale qui fonctionne comme une sous-unité principale du complexe PI3K de classe III, médiant la production de phosphatidylinositol 3-phosphate. Références connexes : PMID:18570871 PMID:21358617 PMID:23184933
• Elle est essentielle pour la formation de complexes PI3K distincts : PI3KC3-C1 pour l'initiation de l'autophagosome et PI3KC3-C2 pour la maturation de l'autophagosome et l'endocytose. Références connexes : PMID:20208530 PMID:20643123 PMID:23974797
• Beclin-1 est impliquée dans le trafic endocytique et l'étape d'abscission de la cytocinèse. Références connexes : PMID:25275521
• Un fragment mitochondrial de 35 kDa de Beclin-1 favorise l'apoptose en induisant la translocation de BAX et la libération de facteurs pro-apoptotiques.
• Elle se localise dans plusieurs organites : cytoplasme, appareil de Golgi, endosomes, réticulum endoplasmique, mitochondries, autophagosomes et noyau, ce qui est cohérent avec ses rôles dans le trafic membranaire.
• Beclin-1 protège contre l'infection par le virus Sindbis neurovirulent, indiquant un rôle dans la défense antivirale.
• Beclin-1 subit diverses modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation sur la Ser15, l'acétylation et l'ubiquitination, qui régulent ses fonctions.

Conseils expérimentaux et techniques

• L'immunogène est un phosphopeptide synthétique spécifique de la Ser15 de la Beclin-1 humaine. Pour confirmer la spécificité de la phosphorylation, envisagez d'utiliser des échantillons traités à la phosphatase ou des essais de compétition par peptides dans votre configuration expérimentale.
• Pour le Western blot, une bande autour de 52 kDa est attendue. Optimisez en utilisant des gels en gradient et des conditions de transfert adaptées aux protéines de ce poids moléculaire.
• Pour l'ELISA, le revêtement direct de l'antigène phosphopeptidique peut aider à évaluer la liaison de l'anticorps ; optimisez les tampons de revêtement et les conditions de blocage pour votre format de plaque.
• La réactivité croisée avec la Beclin-1 de souris et de rat est indiquée ; ainsi, des lignées cellulaires ou des lysats tissulaires de ces espèces peuvent être utilisés pour des études fonctionnelles sur l'autophagie.
• La phosphorylation de Beclin-1 peut être transitoire ; incluez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse et traitez les échantillons rapidement pour préserver l'épitope phosphorylé.

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