Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-Bad-S112 pour WB, IHC-P, ELISA - Q92934

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de Bad (agoniste de la mort cellulaire associé à Bcl2)

• Bad (agoniste de la mort cellulaire associé à Bcl2, également connu sous le nom de composant de liaison à Bcl-2 6, protéine de type Bcl-2 8) est un membre pro-apoptotique de la famille Bcl-2 qui favorise la mort cellulaire en entrant en compétition pour la liaison avec les protéines anti-apoptotiques Bcl-X(L), Bcl-2 et Bcl-W.
• Cette compétition perturbe l'hétérodimérisation de Bcl-X(L) avec BAX, inversant ainsi l'activité répresseur de mort de Bcl-X(L) (mais pas celle de Bcl-2), et relie la signalisation des récepteurs aux facteurs de croissance à l'apoptose (par similitude).
• Le gène BAD (Identifiant : 572) code pour un seul produit protéique d'un poids moléculaire d'environ 18 kDa, tel que confirmé par UniProt (Q92934, 18392 Da).
• Bad est localisée sur la membrane mitochondriale externe et dans le cytoplasme, où elle intègre les signaux de survie et de mort ; son activité est étroitement régulée par des modifications post-traductionnelles.
• De multiples modifications post-traductionnelles clés ont été identifiées sur Bad, notamment la phosphorylation, l'acétylation et la méthylation, qui modulent sa fonction pro-apoptotique et sa localisation subcellulaire.
• La phosphorylation sur la Ser-112 (et les sites environnants) inactive Bad en favorisant sa liaison aux protéines 14-3-3 et en la séquestrant dans le cytoplasme, empêchant ainsi sa translocation mitochondriale et l'apoptose.
• Bad est exprimée dans une grande variété de tissus, ce qui correspond à son rôle fondamental dans la régulation de la mort cellulaire programmée dans différents types cellulaires.

Guide expérimental et conseils techniques

• Étant donné que l'immunogène est un phosphopeptide synthétique englobant la S112 de la Bad humaine, cet anticorps est censé reconnaître spécifiquement la forme phosphorylée sur Ser-112 ; il est conseillé de vérifier la spécificité phospho à l'aide de lysats traités à la phosphatase ou d'un anticorps anti-Bad non phosphospécifique comme contrôle.
• Pour l'analyse par transfert de Western (WB), le poids moléculaire prédit de Bad est de 18 kDa ; une bande unique à cette taille approximative devrait être détectée dans des conditions optimales, bien que les utilisateurs doivent valider le signal dans leur système d'échantillon et leur protocole expérimental.
• Pour l'immunohistochimie (IHC-P), la récupération antigénique et les conditions de blocage doivent être optimisées empiriquement ; la localisation attendue étant mitochondriale et cytoplasmique, les profils de marquage doivent être évalués en conséquence.
• Dans les applications ELISA, cet anticorps peut être utilisé pour la capture ou la détection de Bad phosphorylée dans des lysats cellulaires ou tissulaires ; il est recommandé de valider les conditions du test avec des contrôles positifs et négatifs appropriés.
• Étant donné la réactivité croisée avec la Bad murine et de rat, cet anticorps est adapté aux études sur ces organismes modèles courants ; cependant, les utilisateurs doivent confirmer que la séquence autour de la S112 est conservée chez ces espèces.

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