Anticorps monoclonal lapin Phospho-ATR-S428 pour WB et ELISA - Q13535

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la sérine/thréonine-protéine kinase ATR

• L'ATR est une sérine/thréonine-protéine kinase de la famille PIKK qui agit comme capteur des dommages à l'ADN, reconnaissant les séquences consensus [ST]-Q et phosphorylant les cibles downstream en réponse au stress génotoxique (PubMed:10597277, PubMed:10608806, PubMed:10859164). Références associées : PMID:10597277, PMID:10608806, PMID:10859164
• Les substrats clés incluent CHEK1, BRCA1, p53/TP53, RPA2 et RAD17, dont la phosphorylation inhibe la réplication de l'ADN et la mitose, et favorise la réparation, la recombinaison et l'apoptose (PubMed:11114888, PubMed:11418864, PubMed:11865061). Références associées : PMID:11114888, PMID:11418864, PMID:11865061
• Phosphoryle directement l'histone H2AX sur la Ser-139 au niveau des sites de dommages et est nécessaire pour l'ubiquitination de FANCD2 (PubMed:11673449, PubMed:15314022). Références associées : PMID:11673449, PMID:15314022
• Est essentiel pour le maintien de la stabilité des sites fragiles et la duplication correcte des centrosomes (PubMed:12526805). Références associées : PMID:12526805
• Régule la transition S-G2 en limitant l'activité de CDK1 pendant la phase S (PubMed:30139873). Références associées : PMID:30139873
• Agit au niveau de l'enveloppe nucléaire : détecte le stress mécanique, s'y relocalise pour phosphoryler CHEK1 et favorise la rupture de l'enveloppe nucléaire via la phosphorylation de LMNA ; médie également la rupture des micronoyaux et l'activation immunitaire innée cGAS-STING (PubMed:25083873, PubMed:37832547, PubMed:37788673). Références associées : PMID:25083873, PMID:37832547, PMID:37788673
• Régule positivement la redémarrage des fourches de réplication bloquées après son activation par le complexe d'échafaudage KHDC3L-OOEP.
• Il est majoritairement nucléaire, s'associant aux chromosomes et à l'enveloppe nucléaire ; il est exprimé de manière ubiquitaire avec la plus forte présence dans les testicules ; une isoforme alternative (isoforme 2) n'est trouvée que dans le pancréas, le placenta et le foie.

Conseils expérimentaux et conseils techniques

• L'anticorps a été généré contre un phosphopeptide synthétique correspondant aux résidus autour de la Ser-428 de l'ATR humain ; la spécificité doit être confirmée par compétition entre peptide phosphorylé et non phosphorylé ou par traitement des lysats avec une phosphatase.
• Pour le Western blot, notez la grande taille de l'ATR (~301 kDa) ; utilisez des gels à gradient, des temps de transfert prolongés et des marqueurs de poids moléculaire élevé pour une détection optimale.
• Les applications validées sont WB et ELISA ; les utilisateurs finaux doivent titrer l'anticorps pour déterminer les concentrations de travail optimales pour leurs conditions d'essai spécifiques.
• Comme l'ATR est une kinase peu abondante, un enrichissement ou une immunoprécipitation avant le WB peut améliorer le signal dans certains types d'échantillons.
• Conservez l'anticorps conformément aux conditions d'expédition (sac de glace) et évitez les cycles de congélation-décongélation répétés.

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