Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-ATM-S1981 pour WB, IF-P, ELISA - Q13315

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ATM

• L'ATM est une protéine kinase sérine/thréonine qui sert de capteur principal des dommages à l'ADN, reconnaissant les cassures double brin et déclenchant la signalisation des points de contrôle, l'apoptose et les voies de réparation de l'ADN. Références associées : PMID:10550055 PMID:10839545 PMID:10910365
• Elle reconnaît la séquence consensus du substrat [ST]-Q et phosphoryle de nombreuses cibles critiques, notamment H2AX (Ser139), CHEK2, p53, BRCA1 et de multiples protéines de réparation de l'ADN, coordonnant ainsi l'arrêt du cycle cellulaire et la réponse aux dommages. Références associées : PMID:10550055 PMID:10766245 PMID:10802669
• L'ATM se localise dans le noyau, les vésicules cytoplasmiques, le centrosome et les peroxysomes, reflétant son implication non seulement dans la réparation de l'ADN nucléaire, mais aussi dans des processus cytoplasmiques tels que le trafic vésiculaire et la pexophagie. Références associées : PMID:26344566
• Exprimée de manière ubiquitaire dans un large éventail de tissus, y compris le pancréas, le rein, le muscle squelettique, le foie, le poumon, le cerveau et les organes lymphoïdes, ce qui est cohérent avec son rôle fondamental dans la stabilité du génome.
• L'ATM est une phosphoprotéine avec de multiples sites de phosphorylation, et des modifications clés régulent son activité kinase et son recrutement sur les sites de dommages à l'ADN ; elle subit également une acétylation.
• Les mutations perte de fonction dans l'ATM provoquent l'ataxie-télangiectasie, une maladie multisystémique caractérisée par une neurodégénérescence progressive, une immunodéficience et une prédisposition au cancer.

Guide expérimental et conseils techniques

• En raison du poids moléculaire élevé de l'ATM (351 kDa), envisagez des temps de transfert prolongés ou des tampons de transfert modifiés pour le Western blot afin d'assurer un transfert protéique efficace.
• Pour la détection de l'ATM phosphorylée, incluez des inhibiteurs de phosphatases pendant la préparation des échantillons pour préserver le signal de phosphorylation S1981.
• Dans les expériences d'immunoprécipitation (IP/IF-P), validez la spécificité de l'anticorps en utilisant des agents inducteurs de dommages à l'ADN (par exemple, les rayonnements ionisants) pour stimuler la phosphorylation de l'ATM.
• Pour l'ELISA, établissez des dilutions optimales de revêtement et d'anticorps en utilisant des contrôles de phosphopeptide recombinant pour assurer la sélectivité pour la forme phosphorylée S1981.

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