Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-ASK1-T845 pour WB, DB, ELISA - O35099

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'ASK1

• La protéine kinase kinase kinase 5 activée par les mitogènes (MAP3K5), également désignée Apoptosis signal-regulating kinase 1 (ASK-1) ou MEK kinase 5 (MEKK5), est une sérine/thréonine kinase codée par le gène Map3k5 chez la souris.
• Fonctionne comme un composant central de la cascade de transduction du signal des MAP kinases, traduisant les signaux environnementaux en décisions cellulaires impliquant la différenciation, la survie et l'apoptose.
• Joue un rôle critique dans la voie d'apoptose dépendante des mitochondries via l'activation des caspases, en réponse à divers stimuli de stress.
• Essentielle pour les réponses immunitaires innées ; médie la signalisation déclenchée par le stress oxydatif, le TNF et le LPS, conduisant à l'activation des voies MKK4/MKK7–JNK et MKK3/MKK6–p38 MAPK.
• Se localise principalement dans le cytoplasme et le réticulum endoplasmique.
• Exprimée de manière généralisée dans les tissus adultes de souris, y compris le cœur, le cerveau, le poumon, le foie et le rein.
• La protéine est sujette à la phosphorylation, la méthylation et l'ubiquitination ; la phosphorylation de Thr845 est un événement clé d'activation en réponse au stress.

Guide expérimental et conseils techniques

• L'anticorps est généré contre un peptide phospho-synthétique couvrant Thr845 de l'ASK1 de souris, offrant une haute spécificité pour la forme activée de cette kinase.
• En western blot, une bande prononcée d'environ 155 kDa est attendue ; des marqueurs de poids moléculaire pré-colorés doivent être inclus pour confirmer la taille de la bande.
• Pour une détection robuste de la phospho‑ASK1 endogène, stimuler les cellules avec un agent de stress approprié (par exemple, stress oxydatif ou TNFα) et inclure des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse et de réaction.
• Le produit est adapté aux applications de dot‑blot et d'ELISA ; lors de l'utilisation de ces formats, optimiser les conditions de blocage et de lavage pour minimiser le bruit de fond.
• Comme pour tout anticorps spécifique de la phosphorylation, confirmer la spécificité du signal en traitant les échantillons avec la λ‑phosphatase pour vérifier la perte d'immunoréactivité.

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