Phospho-APP-T668 Rabbit pAb pour WB et ELISA - P05067

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de la protéine précurseur du peptide amyloïde-bêta

• La protéine précurseur du peptide amyloïde-bêta (APP) est une glycoprotéine transmembranaire de type I qui existe sous plusieurs isoformes, l'APP695 prédominant dans les neurones et l'APP751/APP770 dans les cellules non neuronales. Elle est également connue sous les noms d'ABPP, APPI et peptide amyloïde vasculaire cérébral.
• L'APP fonctionne comme un récepteur de surface cellulaire impliqué dans la croissance des neurites, l'adhésion neuronale et l'axogenèse. L'interaction entre les molécules d'APP sur les cellules voisines favorise la synaptogenèse. Références connexes : PMID:25122912
• L'APP agit comme un récepteur membranaire de la kinésine I, assurant le transport antérograde axonal de la bêta-sécrétase et de la préséniline 1, et joue un rôle dans le transport de cargaisons vers les synapses. Références connexes : PMID:17062754 PMID:23011729
• L'APP subit un traitement protéolytique pour générer des peptides amyloïde-bêta, qui sont des chélateurs de métaux lipophiles liant le cuivre, le zinc et le fer. Ces peptides favorisent l'agrégation et la phosphorylation de la tau et peuvent induire un stress oxydatif et une neurotoxicité.
• Au niveau subcellulaire, l'APP est localisée à la membrane cellulaire, au péricaryon, aux cônes de croissance, aux puits recouverts de clathrine, aux endosomes précoces, et est également sécrétée. Elle peut être trouvée à la surface cellulaire, dans le noyau et le cytoplasme dans certaines conditions.
• Spécificité tissulaire : l'APP est fortement exprimée dans le cerveau et le liquide céphalo-rachidien, avec les niveaux les plus élevés dans le cortex frontal. Elle est également exprimée dans le rein, le cœur et la rate. L'isoforme APP695 est neuronale, tandis que l'APP751 est abondante dans les lymphocytes T.
• La phosphorylation sur la Thr668 (T668) est une modification régulatrice clé de l'APP. Cet anticorps reconnaît spécifiquement la forme phosphorylée, permettant l'étude de la signalisation et du traitement dépendants de la phosphorylation.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps a été élevé contre un phosphopeptide synthétique correspondant aux résidus entourant la Thr668 de l'APP humaine. Il convient pour détecter les niveaux endogènes d'APP uniquement lorsqu'elle est phosphorylée sur T668.
• Pour le Western blot, une plage de dilution initiale de 1:500–1:2000 est typique pour les anticorps polyclonaux ; optimisez en fonction de votre échantillon et de votre système de détection. Validez la spécificité en traitant les lysats cellulaires avec la phosphatase lambda.
• Le poids moléculaire prédit de l'APP pleine longueur est d'environ 87 kDa, mais les modifications post-traductionnelles et le traitement protéolytique peuvent produire plusieurs bandes. Incluez des marqueurs de poids moléculaire appropriés.
• Pour l'ELISA, utilisez comme anticorps de capture ou de détection selon le format de votre dosage ; l'appariement avec un autre anticorps anti-APP peut être nécessaire pour un ELISA sandwich.
• Une réactivité croisée avec la souris et le rat a été rapportée ; vérifiez dans votre tissu cible pour confirmer la réactivité croisée et la spécificité.
• Envisagez d'utiliser des échantillons frais ou correctement stockés, et évitez les cycles répétés de congélation-décongélation pour préserver l'état de phosphorylation.

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