pAb de lapin Phospho-AP2M1-T156 pour WB et ELISA - Q96CW1

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'AP2M1 (sous-unité mu du complexe AP-2)

• AP2M1 code pour la sous-unité μ2 du complexe adaptateur protéique hétérotétramérique AP-2, qui agit comme adaptateur de cargaison associé à la clathrine lors de la formation des vésicules à manteau de clathrine. Références associées : PMID:12694563, PMID:12952941, PMID:14745134
• La sous-unité μ2 reconnaît directement les motifs d'endocytose Y‑X‑X‑Φ et [ED]‑X‑X‑X‑L‑[LI] au niveau des queues cytoplasmiques des protéines transmembranaires cargaison, permettant un tri sélectif pour l'endocytose médiée par la clathrine. Références associées : PMID:16581796, PMID:12694563, PMID:14745134
• La phosphorylation de μ2 au niveau du Thr‑156 par la kinase AAK1 déclenche un changement conformationnel qui expose le site de liaison Y‑X‑X‑Φ, permettant l'engagement de la cargaison au niveau de la membrane plasmique. Références associées : PMID:11877457
• Au-delà de l'endocytose classique médiée par la clathrine, AP‑2 participe au trafic non clathrinique régulé par ARF6 et au recyclage des membranes des vésicules synaptiques depuis les surfaces présynaptiques. Références associées : PMID:19033387, PMID:12694563
• Dans les neurones de l'hippocampe, AP‑2 médie l'endocytose dépendante de l'activité d'ADAM10 lors de la potentialisation à long terme. Références associées : PMID:23676497
• La protéine se localise à la membrane cellulaire et dans les puits à manteau de clathrine, ce qui est cohérent avec son rôle dans la formation des vésicules endocytiques. Elle est exprimée au niveau protéique dans le cerveau et est classée sous les mots-clés : endocytose, phosphoprotéine, épissage alternatif, variants pathogènes (épilepsie, déficience intellectuelle).

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique autour du Thr156 de l'AP2M1 humaine ; l'anticorps est censé reconnaître spécifiquement la forme phosphorylée. Pour le Western blot, utilisez des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons pour préserver le signal phosphorylé.
• En WB, une bande d'environ 50 kDa (poids moléculaire observé) est attendue. Envisagez d'inclure un contrôle déphosphorylé ou une compétition antigénique avec le peptide non phosphorylé pour confirmer la spécificité vis-à-vis de la phosphorylation.
• Pour l'ELISA, le peptide phosphorylé peut servir de contrôle positif ; validez la linéarité et la sensibilité dans la matrice d'échantillon correspondante.
• L'anticorps a une réactivité croisée avec les échantillons humains et souris. Si vous travaillez avec d'autres espèces, vérifiez l'homologie de séquence autour du Thr156 avant utilisation.

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