Anticorps Polyclonal de Lapin Phospho-AMPKa1-T183/AMPKa2-T172 pour WB, ELISA - Q13131 / P54646

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de AMPKα1/AMPKα2

• La sous-unité catalytique alpha-1 de la protéine kinase activée par l'AMP-5' (AMPKα1, encodée par PRKAA1) fonctionne comme le principal capteur d'énergie dans les cellules eucaryotes, phosphorylant un large éventail de substrats pour orchestrer l'adaptation métabolique. Références associées : PMID:17307971, PMID:17712357, PMID:24563466
• Elle inhibe les voies anaboliques incluant la biosynthèse des protéines, des glucides et des lipides, tout en favorisant les processus cataboliques tels que l'oxydation des acides gras et la capture du glucose, en partie via la phosphorylation directe d'enzymes métaboliques comme ACACA et HMGCR.
• AMPKα1 régule également l'expression génique en phosphorylant des régulateurs transcriptionnels (par ex. CRTC2, FOXO3, SREBF1), impactant la gluconéogenèse, le métabolisme lipidique et les réponses au stress. Références associées : PMID:11518699, PMID:11554766, PMID:15866171
• Au-delà du métabolisme, AMPKα1 contrôle la croissance cellulaire et l'autophagie via l'inhibition de mTORC1 (phosphorylant RPTOR, TSC2, FNIP1) et l'activation de ULK1, assurant la survie sous stress nutritionnel. Références associées : PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:21205641, PMID:37079666
• Localisée dans le cytoplasme, le noyau et les endosomes tardifs, AMPKα1 se déplace dynamiquement pour phosphoryler des cibles dans plusieurs compartiments, reliant la localisation sous-cellulaire à une spécificité fonctionnelle.
• AMPKα1 est une sérine/thréonine kinase et une phosphoprotéine, son activité étant finement régulée par phosphorylation, particulièrement au niveau des résidus de la boucle d'activation ; elle subit également une ubiquitination et une acétylation.
• L'épissage alternatif produit plusieurs isoformes, contribuant potentiellement à une régulation spécifique aux tissus et à des résultats de signalisation distincts.
• L'AMPKα2 apparentée (PRKAA2, SWISS P54646) partage une forte homologie et est également détectée par cet anticorps, permettant l'analyse combinée des deux sous-unités catalytiques.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• L'immunogène est un peptide synthétique phosphorylé correspondant aux résidus autour de Thr183 de la protéine humaine PRKAA1. Cet anticorps est adapté pour détecter les niveaux endogènes d'AMPKα1 et d'AMPKα2 phosphorylées en Western blot, avec des bandes attendues autour de 64 kDa (AMPKα1) et 62–65 kDa (AMPKα2).
• Pour le Western blot, envisagez d'utiliser des tampons de lyse spécifiques à la phosphorylation, supplémentés avec des inhibiteurs de phosphatases, pour préserver l'épitope phospho et optimiser l'intensité du signal.
• Dans les applications ELISA, l'anticorps peut fonctionner comme réactif de capture ou de détection ; incluez des contrôles avec des peptides phosphorylés et validez la performance par rapport aux versions non phosphorylées pour assurer la spécificité.
• Une réactivité croisée avec des échantillons de souris et de rat est attendue en raison de la forte conservation de séquence autour des sites de phosphorylation, mais vérifiez toujours la détection dans votre matrice d'échantillon spécifique et vos conditions expérimentales.

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