Phospho-AMPKα1-T183+AMPKα2-T172 mAb de lapin - Q13131 / P54646

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'AMPKα

• AMPKα1 (PRKAA1) et AMPKα2 (PRKAA2) sont deux isoformes de sous-unités alpha catalytiques du complexe hétérotrimérique AMPK, qui contient également des sous-unités bêta et gamma régulatrices.
• Sous-unité catalytique de l'AMPK, une protéine kinase capteur d'énergie qui active les voies de production d'énergie et inhibe les processus consommateurs d'énergie (par exemple, la biosynthèse des protéines, des glucides et des lipides) pour maintenir l'homéostasie énergétique cellulaire.
  Références associées :
  PMID:17307971 PMID:17712357 PMID:24563466
• Régule le métabolisme lipidique en favorisant la lipolyse par phosphorylation de CHKA (PubMed:34077757) et en inactivant les enzymes de biosynthèse lipidique telles que ACACA, ACACB et HMGCR (par similarité).
  Références associées :
  PMID:34077757
• Phosphoryle les régulateurs de transcription clés (par exemple, CRTC2, FOXO3, HDAC5, MEF2C, MLXIPL, p53) et l'histone H2B pour moduler l'expression génique liée au métabolisme énergétique et aux réponses au stress.
  Références associées :
  PMID:11518699 PMID:11554766 PMID:15866171
• Agit comme un régulateur négatif essentiel du complexe de signalisation mTORC1 en phosphorylant RPTOR, TSC2 et WDR24, et favorise l'autophagie en activant ULK1 et WDR45 en cas de limitation en nutriments.
  Références associées :
  PMID:14651849 PMID:18439900 PMID:20160076 PMID:21205641 PMID:28561066 PMID:36732624 PMID:37079666
• De plus, AMPKα1 phosphoryle CASP6 pour empêcher son activation (PubMed:32029622), régule le remodelage du cytosquelette d'actine (PubMed:17486097), et module la fragmentation mitochondriale et le recrutement d'ALDH7A1 dans des conditions de stress.
  Références associées :
  PMID:32029622 PMID:17486097 PMID:36367943 PMID:31492851 PMID:40233740
• Au niveau sous-cellulaire, l'AMPKα1 se localise dans le cytoplasme, le noyau et les endosomes tardifs, ce qui est cohérent avec ses larges rôles régulateurs.
• Caractérisé comme sérine/thréonine-protéine kinase, phosphoprotéine et glycoprotéine, avec un épissage alternatif rapporté.

Conseils expérimentaux et conseils techniques

• L'anticorps a été obtenu contre un phospho-peptide synthétique couvrant les sites de phosphorylation de la boucle d'activation (Thr183 dans AMPKα1 et Thr172 dans AMPKα2), ce qui le rend spécifique des formes actives phosphorylées de l'AMPKα.
• Pour le Western blot, des bandes attendues sont observées à environ 64 kDa (AMPKα1) et 62/65 kDa (AMPKα2) ; l'inclusion d'inhibiteurs de phosphatase pendant la préparation de l'échantillon est essentielle pour préserver la phosphorylation.
• Validez la spécificité de détection en traitant les lysats avec λ-phosphatase ou par inhibition compétitive avec le peptide non phosphorylé dans votre système d'échantillon concerné (par exemple, lignées cellulaires humaines, de souris ou de rat).
• Les applications ELISA peuvent nécessiter l'optimisation de la concentration de l'antigène de revêtement et des conditions de détection en raison de la nature de l'immunogène peptidique.
• À noter que l'anticorps est validé pour WB et ELISA ; la performance dans d'autres applications telles que IHC, IF ou IP doit être testée empiriquement.

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