Anticorps Monoclonal Lapin Phospho-AMPKα1-S496 pour WB, ELISA - Q13131

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation de l'AMPKα1

• L'AMPKα1, codée par le gène PRKAA1, est la sous-unité catalytique alpha-1 de la protéine kinase activée par l'AMP (AMPK) hétérotrimérique, un capteur central de l'énergie cellulaire.
• En réponse à une faible concentration d'ATP intracellulaire, l'AMPKα1 phosphorylate des enzymes métaboliques clés et des facteurs de transcription pour inhiber les processus anaboliques (synthèse des lipides, des protéines et des glucides) et promouvoir les voies cataboliques, rétablissant ainsi l'homéostasie énergétique. Références connexes : PMID:17307971, PMID:17712357, PMID:24563466
• L'AMPKα1 régule directement le métabolisme lipidique en phosphorylant et inactivant les carboxylases d'acétyl-CoA (ACACA et ACACB), la réductase HMG-CoA (HMGCR) et la lipase sensible aux hormones (LIPE), contrôlant ainsi la synthèse des acides gras et du cholestérol.
• Il joue également un rôle critique dans l'homéostasie du glucose en phosphorylant CRTC2/TORC2 (entraînant une séquestration cytoplasmique) et en favorisant la translocation de GLUT4 vers la membrane plasmique.
• Au-delà du métabolisme, l'AMPKα1 supprime la croissance et la prolifération cellulaires en inhibant la voie mTORC1 par phosphorylation de TSC2, RPTOR et WDR24, et active l'autophagie via la phosphorylation d'ULK1 et WDR45/WIPI4. Références connexes : PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:21205641, PMID:28561066, PMID:36732624, PMID:37079666
• La localisation subcellulaire comprend le cytoplasme, le noyau et les endosomes tardifs, ce qui est cohérent avec ses rôles dans la régulation métabolique, la transcription génique et la signalisation endosomale.
• L'AMPKα1 est une phosphoprotéine régulée par phosphorylation sur divers résidus ; la phosphorylation sur Ser496 a été identifiée et pourrait influencer son activité kinase ou sa localisation.

Guidance Expérimentale et Conseils Techniques

• Incluez toujours des inhibiteurs de phosphatases lors de la lyse cellulaire et de la préparation des échantillons pour préserver l'épitope phospho.
• Validez la spécificité en traitant les échantillons avec la phosphatase lambda protéique ou par compétition avec le peptide phospho-immunisant ; la perte de signal confirme la spécificité phospho.
• Pour le Western blot, attendez-vous à une bande à environ 64 kDa dans les lignées cellulaires humaines ou murines ; l'activation de l'AMPK par l'AICAR, la metformine ou la privation de glucose peut améliorer la détection.
• Dans les ELISA, envisagez d'utiliser cet anticorps en combinaison avec un anticorps de capture pan-AMPKα pour quantifier les niveaux de phospho-AMPKα1 (S496).

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