Phospho-AKT1S1/PRAS40-T246 pAc Lapin pour WB, ELISA - Q96B36

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'AKT1S1/PRAS40

• AKT1S1 (également connu sous le nom de PRAS40, substrat riche en proline de 40 kDa de l'AKT) est un régulateur négatif de la cible mécanique de la rapamycine complexe 1 (mTORC1), un capteur central de nutriments conservé au cours de l'évolution qui stimule les réactions anaboliques et la biosynthèse des macromolécules pour favoriser la production de biomasse cellulaire et la croissance. Références connexes : PMID:17277771 | PMID:17386266 | PMID:17510057
• En l'absence d'insuline et de nutriments, AKT1S1 s'associe au complexe mTORC1 et inhibe directement l'activité de mTORC1 en bloquant le site de recrutement du substrat MTOR. Références connexes : PMID:29236692
• En réponse à l'insuline et aux nutriments, AKT1S1 se dissocie de mTORC1, un processus dépendant de son état de phosphorylation et de sa liaison aux protéines 14-3-3. Références connexes : PMID:17386266 | PMID:18372248 | PMID:16174443
• La phosphorylation sur Thr246 (le site de l'immunogène) favorise la liaison aux 14-3-3 et soulage l'inhibition de mTORC1.
• AKT1S1 se localise principalement dans le cytoplasme et le cytosol.
• Large expression avec les niveaux les plus élevés dans le foie et le cœur ; l'expression est élevée dans certaines lignées cellulaires cancéreuses (p. ex., A-549, HeLa) par rapport aux cellules normales (p. ex., HEK293).
• Peut également jouer un rôle dans la neuroprotection médiée par le facteur de croissance nerveux (Par similitude).
• Classé comme une phosphoprotéine avec un poids moléculaire calculé d'environ 27 kDa (UniProt : 27383 Da) ; subit un épissage alternatif.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Cet anticorps détecte spécifiquement la forme phosphorylée Thr246 d'AKT1S1 ; il ne reconnaît pas la protéine non phosphorylée. Incluez des lysats traités à la phosphatase comme témoin négatif pour confirmer le signal dépendant de la phosphorylation.
• Pour le Western blotting, attendez-vous à une bande près de 27 kDa. Utilisez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse pour préserver les états de phosphorylation.
• Dans les applications ELISA, envisagez de revêtir avec l'immunogène peptide phospho et validez la spécificité contre le peptide non phosphorylé correspondant.
• Lors de l'étude de la signalisation mTORC1, stimulez les cellules avec de l'insuline ou des facteurs de croissance pour induire la phosphorylation d'AKT1S1 et surveillez la dissociation du complexe mTORC1.
• Validez l'anticorps dans votre système expérimental ; les lignées cellulaires cancéreuses humaines (p. ex., HeLa, A-549) peuvent présenter une expression endogène plus élevée, facilitant la détection.

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