Anticorps Monoclonal Lapin Phospho-AKT1S1/PRAS40-T246 pour WB, ELISA - Q96B36

Spécifications et Paramètres Principaux du Produit

Contexte Biologique : Fonction et Localisation d'AKT1S1/PRAS40

• Le substrat 1 riche en proline d'AKT1 (AKT1S1), communément appelé PRAS40 (substrat riche en proline d'AKT de 40 kDa), est codé par le gène AKT1S1 chez l'homme.
• AKT1S1 agit comme un régulateur négatif clé de la cible mécanique de la rapamycine complexe 1 (mTORC1), un capteur central de nutriment qui favorise la croissance cellulaire et l'accumulation de biomasse. Il inhibe directement l'activité de mTORC1 en bloquant le site de recrutement du substrat de la kinase MTOR. Références connexes : PMID:17277771, PMID:17386266, PMID:17510057, PMID:29236692
• En réponse à l'insuline et aux nutriments, AKT1S1 se dissocie de mTORC1, levant l'inhibition et permettant à la signalisation mTORC1 de procéder, un processus étroitement lié à son état de phosphorylation et à son association avec les protéines 14-3-3. Références connexes : PMID:17386266, PMID:18372248, PMID:16174443
• Principalement localisé dans le cytoplasme et le cytosol, AKT1S1 est largement exprimé dans les tissus, avec les niveaux les plus élevés observés dans le foie et le cœur. Notamment, son expression est souvent élevée dans les lignées cellulaires cancéreuses telles que A-549 et HeLa par rapport aux lignées cellulaires normales.
• La protéine subit plusieurs modifications post-traductionnelles, notamment la phosphorylation sur plusieurs résidus et la méthylation, et est sujette à l'épissage alternatif, contribuant à sa régulation fonctionnelle.
• Au-delà de la signalisation métabolique, AKT1S1 pourrait également jouer un rôle dans la neuroprotection médiée par le facteur de croissance des nerfs, bien que cette fonction soit principalement déduite de la similitude avec d'autres espèces.

Conseils Expérimentaux et Astuces Techniques

• Cet anticorps a été généré en utilisant un phosphopeptide synthétique correspondant au site de phosphorylation Thr246. Pour maintenir la détection spécifique au phospho, envisagez d'utiliser des inhibiteurs de phosphatases lors des étapes de lyse cellulaire/tissulaire et d'immunoprécipitation.
• Pour le western blotting (WB), une bande protéique d'environ 27 kDa est attendue sur la base du poids moléculaire calculé d'AKT1S1.
• Lors de la réalisation d'un ELISA, un blocage approprié par peptide et des contrôles de peptides phosphorylés/non phosphorylés peuvent aider à confirmer la spécificité pour la forme phosphorylée en T246.
• Compte tenu de l'expression ubiquitaire et de la phosphorylation conditionnelle d'AKT1S1, il est recommandé de valider les performances de l'anticorps dans le système d'échantillon pertinent (par exemple, cellules stimulées à l'insuline par rapport aux cellules privées).

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