Phospho-AKT1-T308 Lapin pAb - P31749

Spécifications et paramètres clés du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'AKT1

• L'AKT1 est un membre de la famille des sérine/thréonine kinases AKT qui médie divers processus cellulaires, notamment le métabolisme, la prolifération, la survie, la croissance et l'angiogenèse en phosphorylant de nombreuses cibles en aval. Références connexes : PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136 PMID:21432781

• Elle joue un rôle central dans la signalisation de l'insuline en favorisant l'absorption du glucose via la translocation de SLC2A4/GLUT4 et en régulant la synthèse du glycogène par phosphorylation inhibitrice de GSK3A (Ser-21) et GSK3B (Ser-9).

• L'AKT1 favorise la synthèse des protéines et la croissance cellulaire en phosphorylant TSC2 sur Ser-939 et Thr-1462, activant ainsi la voie mTORC1. Références connexes : PMID:12150915 PMID:12172553

• Elle régule la survie cellulaire en inhibant les facteurs pro-apoptotiques : phosphorylant MAP3K5/ASK1 sur Ser-83 pour supprimer l'apoptose induite par le stress oxydatif et phosphorylant BAD pour inactiver sa fonction pro-apoptotique. Références connexes : PMID:11154276 PMID:10926925

• L'AKT1 phosphoryle les facteurs de transcription FOXO (FOXO1 sur Thr-24, Ser-256, Ser-319 ; FOXO3 et FOXO4 sur des sites équivalents), entraînant leur rétention cytoplasmique et leur inactivation, ce qui favorise la prolifération cellulaire. Références connexes : PMID:10358075

• Au niveau subcellulaire, l'AKT1 se localise dans le cytoplasme, le noyau, la membrane cellulaire et l'espace intermembranaire mitochondrial, ce qui correspond à ses multiples rôles de signalisation.

• L'AKT1 est largement exprimée dans les tissus humains, avec des niveaux de protéines augmentés dans les cancers de la prostate et du sein, en particulier la forme phosphorylée Tyr-176 montrant une expression élevée lors de la progression du cancer du sein.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Pour le western blotting, envisagez d'utiliser des lysats cellulaires stimulés à l'insuline ou traités avec des facteurs de croissance comme témoins positifs, et incluez toujours des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons pour préserver la phosphorylation sur Thr308.
• Validez la spécificité en comparant le signal avec un anticorps AKT1 total, et testez l'anticorps dans le système modèle pertinent (humain, souris ou rat) pour confirmer la bande attendue à ~56 kDa.
• Pour les applications ELISA, vérifiez la détection du peptide phosphorylé par rapport à son homologue non phosphorylé, et optimisez empiriquement les concentrations de revêtement et les dilutions d'anticorps.

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