Anticorps monoclonal de lapin anti-Phospho-Akt (S473) pour WB, ELISA - P31749 / P31751 / Q9Y243

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation d'AKT (AKT1/AKT2/AKT3)

• AKT1 est une sérine/thréonine-protéine kinase et l'une des trois isoformes d'AKT (AKT1, AKT2, AKT3) qui médient la signalisation en aval de PI3K, régulant le métabolisme, la prolifération, la survie cellulaire, la croissance et l'angiogenèse. Références associées : PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• Il phosphoryle GSK3 pour réguler la synthèse du glycogène et la prolifération cellulaire, et favorise la capture du glucose en médiant la translocation induite par l'insuline du transporteur de glucose GLUT4.
• AKT1 favorise la survie cellulaire en phosphorylant des facteurs pro-apoptotiques, y compris MAP3K5 (kinase liée au signal d'apoptose), inhibant ainsi l'apoptose induite par le stress oxydatif. Références associées : PMID:11154276
• Par phosphorylation de TSC2 sur Ser-939 et Thr-1462, AKT active la voie mTORC1, améliorant la synthèse protéique et la croissance cellulaire. Références associées : PMID:12150915 PMID:12172553
• AKT régule les facteurs de transcription FOXO en phosphorylant FOXO1, FOXO3 et FOXO4, conduisant à leur rétention cytoplasmique et à l'inhibition de l'expression des gènes pro-apoptotiques. Références associées : PMID:10358075
• Il module la transcription dépendante de NF-kappa-B et phosphoryle CREB1, induisant l'expression de gènes pro-survie tels que BCL2 et MCL1. Références associées : PMID:9829964
• AKT1 est localisé dans le cytoplasme, le noyau, la membrane cellulaire et l'espace intermembranaire mitochondrial, reflétant ses divers rôles fonctionnels.
• La protéine est largement exprimée dans les types cellulaires humains, avec une expression et une phosphorylation accrues observées lors de la progression du cancer de la prostate et du sein.

Guide expérimental et conseils techniques

• Cet anticorps est produit contre un peptide phosphorylé correspondant à Ser473 de l'AKT1 humain ; il peut reconnaître le site de phosphorylation équivalent sur AKT2 et AKT3 en raison de la conservation de la séquence.
• Pour le Western blot, incluez des inhibiteurs de phosphatases dans les tampons de lyse et envisagez d'utiliser un contrôle traité par phosphatase pour confirmer la spécificité phospho.
• Poids moléculaires prédits : 48–55 kDa pour les différentes isoformes d'AKT ; le blocage avec le phosphopeptide immunisant peut aider à vérifier l'identité des bandes.
• Pour l'ELISA, optimisez la concentration de l'antigène de revêtement et envisagez d'utiliser des anticorps appariés spécifiques du phospho et totaux pour la normalisation.
• Validez les performances dans le système d'échantillon et les conditions de traitement pertinents (par exemple, stimulation par un facteur de croissance ou traitements par inhibiteur) avant une utilisation à grande échelle.

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