PolymAb® Phospho-ACC1/ACC2-S79 de lapin pour WB, IF/ICC, ELISA - Q13085 / O00763

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation de l'acétyl-CoA carboxylase 1/2

• ACC1 (acétyl-CoA carboxylase 1, codée par ACACA) est une enzyme multifonctionnelle dépendante de la biotine qui catalyse la carboxylation de l'acétyl-CoA en malonyl-CoA dépendante de l'ATP, première étape limitante de la biosynthèse de novo des acides gras. Références associées : PMID:20457939 PMID:20952656 PMID:29899443
• ACC2 (acétyl-CoA carboxylase 2, codée par ACACB) est une isoforme homologue qui régule principalement l'oxydation des acides gras ; l'anticorps reconnaît un site de phosphorylation conservé commun à ACC1 et ACC2.
• L'enzyme est majoritairement localisée dans le cytoplasme / cytosol.
• ACC1 est exprimé dans le cerveau, le placenta, le muscle squelettique, le rein, le pancréas et les tissus adipeux ; il est présent à faible concentration dans les poumons et n'est pas détecté dans le foie.
• En tant que phosphoprotéine, son activité est modulée par phosphorylation au niveau de résidus clés comme la Ser79 (numérotation ACC1), reliant l'état énergétique cellulaire au métabolisme lipidique.
• La protéine nécessite la biotine comme cofacteur et se lie à l'ATP, au Mg²⁺ ou au Mn²⁺ ; elle possède un domaine porteur de biotine carboxyle essentiel à sa fonction.
• Les modifications post-traductionnelles supplémentaires incluent l'acétylation, et l'enzyme est soumise à une régulation allostérique.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• L'immunogène est un peptide phosphorylé synthétique correspondant aux résidus autour de la Ser79 ; il est donc recommandé d'inclure des inhibiteurs de phosphatases lors de la préparation des échantillons pour préserver le signal de phosphorylation.
• Pour le Western blot, notez le poids moléculaire prédit élevé (~265kDa) ; envisagez d'utiliser des gels SDS-PAGE à faible pourcentage, des temps de transfert prolongés et des marqueurs de poids moléculaire adaptés.
• En IF/ICC, des conditions de fixation et de perméabilisation optimisées peuvent être nécessaires pour obtenir une coloration cytoplasmique robuste.
• Lors de la réalisation d'une ELISA, vérifiez la phospho-spécificité en comparant la liaison au peptide phosphorylé par rapport au peptide non phosphorylé ou après traitement des échantillons par une phosphatase.

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