Anticorps monoclonal lapin PGK1 pour WB, ELISA - P00558

Spécifications et paramètres principaux du produit

Contexte biologique : Fonction et localisation du PGK1

• Le PGK1 code pour la phosphoglycérate kinase 1, une enzyme glycolytique qui catalyse la conversion réversible du 1,3-bisphosphoglycérate en 3-phosphoglycérate, produisant de l'ATP. Références associées : PMID:30323285, PMID:7391028
• En plus de son rôle cytoplasmique, le PGK1 transloque dans la matrice mitochondriale où il fonctionne comme une protéine kinase, phosphorylant le PDK1 pour inhiber le complexe pyruvate déshydrogénase, supprimant la phosphorylation oxydative et favorisant la glycolyse. Références associées : PMID:26942675, PMID:36849569
• Le PGK1 agit comme un cofacteur de l'ADN polymérase alpha (protéine de reconnaissance de l'amorce), reliant la glycolyse à la réplication de l'ADN. Références associées : PMID:2324090
• Il présente une large spécificité de substrat nucléotidique, avec la capacité d'utiliser les formes L et D des nucléotides puriques et pyrimidiques, bien que l'activité pyrimidique soit plus faible. Références associées : PMID:18463139
• Le PGK1 est principalement exprimé dans les spermatogonies et localisé dans la pièce principale du spermatozoïde, suggérant un rôle dans la mobilité des spermatozoïdes. Références associées : PMID:26677959
• L'épissage alternatif génère plusieurs isoformes ; la protéine subit des modifications d'acétylation, de phosphorylation et d'hydroxylation.
• Les variantes associées aux maladies sont liées à l'anémie hémolytique héréditaire due à un déficit en phosphoglycérate kinase.

Conseils expérimentaux et astuces techniques

• Sur la base de la conception de l'immunogène (peptide N-terminal), cet anticorps est censé reconnaître la région N-terminale, ce qui peut permettre de détecter le PGK1 de pleine longueur et les fragments N-terminaux. Validez dans votre contexte expérimental.
• Pour le Western blot, le poids moléculaire attendu est d'environ 45 kDa ; cependant, les modifications post-traductionnelles peuvent provoquer de légers décalages. Utilisez des témoins positifs appropriés (par exemple, lysats HeLa, HepG2) et validez sur des échantillons de souris/rat si une réactivité croisée est souhaitée.
• Pour l'ELISA, envisagez de coupler avec un anticorps de détection ciblant un épitope différent ; optimisez les conditions de revêtement et les titres d'anticorps pour vos besoins spécifiques d'essai.
• Compte tenu de la double localisation cytoplasmique et mitochondriale du PGK1, la fractionnement sous-cellulaire peut être utile pour étudier les fonctions spécifiques aux compartiments.

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